流動相是影響液相色譜的關(guān)鍵因素。一個理想的液相色譜流動相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。高效液相色譜法中的流動相主要用水性溶劑、有機(jī)溶劑或它們的混合液。但是如何配制，選擇配制的方法不同，分析結(jié)果特別是保留時(shí)間，是會有顯著差別的。高效液相色譜法中的流動相主要用水性溶劑、有機(jī)溶劑或它們的混合液，水性溶劑也常用于緩沖液。常因資料上表示的內(nèi)容和實(shí)際的配制方法不同，而產(chǎn)生流動相的差異，影響了色譜圖和分析結(jié)果。一般來說，溶劑的混合按體積比（V/V）或重量比（W/W）進(jìn)行。溶液的體積因溫度而變化，所以按重量比混合可調(diào)制再現(xiàn)性較好的混合溶劑，但由于操作較麻煩，通常多用體積比混合。只要沒有特別標(biāo)明，就可按體積比進(jìn)行混合，但在特殊情況下，如胺類粘度高的溶液混合時(shí)，有時(shí)用重量—體積比（W/V）的方法。

液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點(diǎn)：