詳細介紹
實驗收費標準:
項目編號 | 項目名稱 | 計價單位 | 單價 |
ZC1128 | [免疫熒光/IF] - FJB染色 | 張 | 55元 |
服務(wù)介紹:
FJB染色的原理是FJB染液是一種帶熒光的物質(zhì),可以與變性的神經(jīng)元結(jié)合從而發(fā)綠色熒光,而正常神經(jīng)元不會與FJB染液結(jié)合所以不發(fā)熒光。
FJB可以與變性神經(jīng)元結(jié)合發(fā)出綠色熒光,從而可以標記神經(jīng)組織內(nèi)的變性壞死神經(jīng)元。可以借此研究不同處理方法對神經(jīng)組織的損傷。
實驗結(jié)果展示:
實驗流程:
純水配成5mg/ml的濃縮液,用時0.1%的冰醋酸做溶劑,1:50-1:100稀釋
染色方法
1、石蠟切片脫蠟至水。
2、用現(xiàn)配的0.1%冰醋酸做溶劑,按1:50-1:100配制FJB的工作液,混勻,滴加到組織上室溫孵育20min;
3、純水沖洗,DAPI染核,再用PBS沖洗;
4、吹風(fēng)機吹干,二甲苯透明2min,加一滴中性樹脂封片,晾干。
結(jié)果判讀:
壞死神經(jīng)元胞漿和胞核呈綠色熒光,正常神經(jīng)元無著色。神經(jīng)元著色有時候伴隨著腦梗,在梗死附近著色較明顯。
注意事項:
1、FJB染色中用到的0.1%的冰醋酸要現(xiàn)配現(xiàn)用。
2、所有染色步驟完成后,切片要自然晾干或用吹風(fēng)機低檔吹干,然后透明,樹膠封片,因為已結(jié)合的FJB可溶于甘油,酒精,所以不能直接用熒光封片劑封片,也不能在酒精中做脫水處理。
3、FJB與組織的結(jié)合可逆,因此做完后要盡快鏡檢拍照,避免熒光淬滅。