詳細介紹
產品品牌:ZCIBIO(茁彩生物)
小鼠上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒
英文名稱 : Mouse E-Cad elisa kit
產品規(guī)格:48T/96T
實驗樣本:血清、血漿、細胞上清液、組織、等其他相關生物樣本
應用領域: 僅供科研實驗,不得用于臨床診斷,使用前請認真閱讀說明書
保存條件:2~8℃,有效期6個月。
小鼠上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒實驗前的注意事項
為了幫助您更好地解決在實驗中可能碰到的各種問題,我們設計了這些問題指導,配以試劑盒內的說明書一起供您參考使用。很多因素都將導致免疫測定實驗的失敗,而大多數(shù)技術失誤是可以通過全面閱讀和準確理解說明書以及實驗步驟來避免的。若對試劑盒內的說明書有任何意見和建議,歡迎反饋。我們期待聽到您的聲音,從而完善我們的產品,更好地為您服務。
◆ 仔細閱讀說明書
◆ 檢查試劑盒標簽上的有效期。如果超過有效期,請勿使用。
◆ 按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
◆ 標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。
短期內無法實驗者,注意低溫保存
◆ 準備好所有實驗額外所需物品, (比如移液器,試管,清洗器, 酶標儀)
◆ 按說明書將所用試劑平衡至室溫,根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量
◆ 檢查試劑盒內每種試劑的貯存條件,保證所有試劑均按照試劑盒內說明書推薦的條件存儲。
問 題 | 可能的原因 | 解決方法 |
1.非常弱的結果 | (1)溫育的時間或溫度不夠;(2)顯色反應時間太短;(3)所用配制緩沖液的蒸餾水有問題;(4)加入抗體/酶的稀釋液濃度太低;(5)酶標儀濾光片不正確;(6)不正確的試劑儲存方式;(7)試劑盒沒有充分平衡;(8)移液器吸液量不足,吸嘴內壁掛水太多或內壁不清潔。 | 校正溫育箱溫度;校正定時鐘準確定時;使用新鮮合格的蒸餾水;按照說明書保存試劑盒和準確配制工作液;試劑室溫平衡至少 20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃);校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密,吸嘴內壁要清潔,最好一次性使用。 |
2.標準曲線和測定的重復性差 | 這是典型的由測定操作引起的問題,包括(1)加樣本及試劑量不準;孔間不一致;(2)加樣過快,孔間發(fā)生污染;(3)加錯樣本;(4)加樣本及試劑時,加在孔壁上部非包被區(qū);(5)不同批號試劑盒中組分混用;(6)溫育時間、洗板、顯色時間不一致;(7)孔內污染雜物;(8)酶標儀濾光片不正確;(9)試劑/樣品沒有混勻;(10)血清標本未*凝固即加入,反應孔內出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細胞,易出現(xiàn)假陽性反應等。 | 重復某一樣品時,加樣時間盡可能與第一次接近;重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;樣品稀釋前應充分混勻;盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。 |
3.白板(陽性對照不顯色) | (1)漏加酶結合物;(2)洗板液配制中出現(xiàn)問題,如量筒不干凈,含酶抑制物(如疊氮鈉)等;(3)添加的試劑錯誤或者被遺漏;(4)試劑過期; | 請按說明書所示稀釋倍數(shù)配制;注意不要漏加;每次加液前均應核對標簽。 |
4.空白背景高 | (1)洗板不干凈;(2)顯色液變質;(3)試劑過期;(4)不正確的試劑稀釋液,如加酶的濃度過高; | 濃縮洗液準確配制;50 倍濃縮洗滌液如有結晶則應讓結晶于室溫全部溶解后再量取稀釋;充分洗滌,*拍干;加樣或加酶拍板 |
此產品提供免費代測服務,上海茁彩生物科技有限公司專注酶聯(lián)免疫,專注ELISA,期待您的來電!