人骨成型蛋白（BMP）ELISA 試劑盒

人骨成型蛋白（BMP）ELISA 試劑盒

?產(chǎn)品信息

【用途】

該試劑盒采用“一步"夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞或其他相關(guān)生物液體中BMP濃度。

【檢測(cè)原理】

將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體，將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（O.D.值），計(jì)算樣品濃度。

【特異性】

可檢測(cè)樣本中的BMP, 且與其它類似物無明顯交叉反應(yīng)。

【重復(fù)性】

板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%

【批內(nèi)差】

取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè)，每份樣本連續(xù)測(cè)定20次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。

【批間差】

選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本定量測(cè)定，每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。

【精密度】

精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批間差: CV<13%

【穩(wěn)定性】

經(jīng)測(cè)定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。 為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。

人骨成型蛋白（BMP）ELISA 試劑盒之ELISA常見問題

?血清血漿的區(qū)別及溶血問題

血液生化指標(biāo)的分析及激素等含量的測(cè)定對(duì)臨床判斷、預(yù)測(cè)藥物毒性作用及疾病的發(fā)生發(fā)展有著重要的意義。那么，血清、血漿、全血有何區(qū)別，各自的用途是什么呢？  

1、常見的血液生化指標(biāo)與激素
        常見的血液生化指標(biāo)：GLU、ALT、AST、TP、ALB、Crc、BUN、CHO、ALP、TBIL、鎂、鈣等。
常見的激素：T、P、E2、T3、T4、FT3、FT4 等。

2、血清、血漿與血液的區(qū)別
     
總之，血清指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。
       （2）血漿：相當(dāng)于結(jié)締組織的細(xì)胞間質(zhì)。是血液的重要組成分，呈淡黃色液體。血漿的化學(xué)成分中，水分占90～92％，溶質(zhì)以血漿蛋白為主。血漿蛋白是多種蛋白質(zhì)的總稱，用鹽析法可將其分為白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原三類。血漿蛋白質(zhì)的功能有：維持血漿膠體滲透壓；組成血液緩沖體系，參與維持血液酸堿平衡；運(yùn)輸營養(yǎng)和代謝物質(zhì)，血漿蛋白質(zhì)為親水膠體，許多難溶于水的物質(zhì)與其結(jié)合變?yōu)橐兹苡谒奈镔|(zhì)；營養(yǎng)功能，血漿蛋白分解產(chǎn)生的氨基酸，可用于合成組織蛋白質(zhì)或氧化分解供應(yīng)能量；參與凝血和免疫作用。血漿的無機(jī)鹽主要以離子狀態(tài)存在，正負(fù)離子總量相等，保持電中性。這些離子在維持血漿晶體滲透壓、酸堿平衡、以及神經(jīng)-肌肉的正常興奮性等方面起著重要作用。血漿的各種化學(xué)成分常在一定范圍內(nèi)不斷地變動(dòng)，其中以葡萄糖、蛋白質(zhì)、脂肪和激素等的濃度最易受營養(yǎng)狀況和機(jī)體活動(dòng)情況的影響，而無機(jī)鹽濃度的變動(dòng)范圍較小。血漿的理化特性相對(duì)恒定是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的首要表現(xiàn)。
       （3）血液：血漿和懸浮其中的血細(xì)胞組成。血液是在循環(huán)系統(tǒng)中，心臟和血管腔內(nèi)循環(huán)流動(dòng)的一種組織。血液組織是結(jié)締組織的一種。
采血完畢后，血清需要在4℃靜置一段時(shí)間（1到數(shù)小時(shí)，甚至過夜）才能離心獲得。而血漿需在采血結(jié)束后，盡快離心，不需要靜置。離心速率都是在3000rpm左右，15-30min。

3、溶血的處理及原因
溶血，即血液中紅細(xì)胞因?yàn)閮?nèi)外界各種原因破裂，血紅蛋白逸出，導(dǎo)致血清、血漿由淡黃色變?yōu)檠t色。實(shí)驗(yàn)過程中如果發(fā)生溶血現(xiàn)象，盡可能重新采血，因?yàn)槿苎獦颖究赡軙?huì)對(duì)血液中的一些生化指標(biāo)和激素含量產(chǎn)生影響。但若無法重新采血，只能根據(jù)自身需要測(cè)量的指標(biāo)，將溶血與非溶血樣本進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)，判斷是否有影響，如果無影響，即可使用溶血樣本進(jìn)行試驗(yàn)。
有文獻(xiàn)顯示，溶血后對(duì)TP、ALB、BUN、CHO、鈣、鎂等生化指標(biāo)無明顯影響。對(duì)血清AST 影響顯著。其他生化指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

引起溶血的原因：
     1）由于抽血困難，采血時(shí)定位進(jìn)針不準(zhǔn)、針尖在血管中探來探去造成血腫等而發(fā)生溶血。
     2）注射器和針頭連接不緊，采血時(shí)空氣進(jìn)入，或患者（動(dòng)物）緊張導(dǎo)致血流不暢，抽血時(shí)間過長(zhǎng)，都會(huì)導(dǎo)致血標(biāo)本中混有泡沫，這種混有泡沫的血標(biāo)本，放置一定時(shí)間后泡沫polie或迅速干燥，造成血細(xì)胞破壞而發(fā)生溶血。
    3）血標(biāo)本在運(yùn)輸過程中（或離心前）過度振蕩或儲(chǔ)存不當(dāng)。
    4）不合格的塑料制品會(huì)因聚合不*而具有毒性，這種毒性可造成溶血。
    5）試管質(zhì)量粗糙。
    6）抽血消毒時(shí)，酒精未干就進(jìn)行抽血。
    7）操作過程中，可能引入的動(dòng)物的毛發(fā)，而導(dǎo)致溶血。
    8）盡量不要收集注射器推到最后的血，也不要使勁擠壓注射器。