詳細(xì)介紹
人E選擇素(E-Selectin)ELISA試劑盒一步法用途
該試劑盒采用“一步"夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞或其他相關(guān)生物液體中E-Selectin濃度。
靈敏性、檢測(cè)范圍、特異性和重復(fù)性
●檢測(cè)范圍:0.625 ng/mL – 20 ng/mL
●靈敏性:0.1 ng/mL
●特異性:可檢測(cè)樣本中的E-Selectin,且與其類(lèi)似物無(wú)明顯交叉反應(yīng)。
●重復(fù)性:板內(nèi),板間變異系數(shù)均 < 10%。
人E選擇素(E-Selectin)ELISA試劑盒一步法檢測(cè)原理
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。
試劑盒內(nèi)容
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 8孔×12條 | 8孔×6條 | 2-8℃ |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6 管 | 0.3mL*6 管 | -20℃(用不完) |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋 |
檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 2-8℃ |
底物A | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
底物B | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
終止液 | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
20×濃洗滌緩沖液 | 25ml | 15ml | 無(wú) |
說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 | 無(wú) |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無(wú) |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無(wú) |
試驗(yàn)所需自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)
2. 高精度移液器,
3. EP管及一次性吸頭:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
4. 雙蒸水或去離子水
5. 37℃恒溫箱
6. 吸水紙
注意事項(xiàng)
1. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著實(shí)驗(yàn)服并戴乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液樣品時(shí),請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條例執(zhí)行。
2. 剛開(kāi)啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。暫時(shí)不用的板條應(yīng)拆卸后放入備用鋁箔袋,按照上述表格中保存條件存放。
3. 檢測(cè)使用的酶標(biāo)儀需要安裝能檢測(cè)450±10nm波長(zhǎng)的濾光片,光密度范圍在0-3.5之間。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份不能混用(反應(yīng)終止液除外)。
5. 試驗(yàn)中所用的EP管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁混用。