▎  斑馬魚骨鈣素（BGP;OCN）ELISA試劑盒用途

該試劑盒采用競爭法檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中斑馬魚骨鈣素（BGP;OCN）的濃度。

▎  檢測原理

試劑盒采用酶聯(lián)免疫分析方法。采用生物素標(biāo)記 BGP;OCN，純化的抗MT抗體包被微孔板，在競爭抑制反應(yīng)中，一定量的固相抗體與生物素標(biāo)記 BGP;OCN及非標(biāo)記抗原（校準(zhǔn)品或標(biāo)本）進(jìn)行抑制競爭反應(yīng)，抗體與生物素標(biāo)記的 BGP;OCN結(jié)合量受非標(biāo)記抗原量所抑制，非標(biāo)記抗原量多,抗體與生物素標(biāo)記的 BGP;OCN結(jié)合就少，反之結(jié)合就多；反應(yīng)平衡后，形成固相抗體-生物素化 BGP;OCN，再加入酶標(biāo)記的親和素，形成固相抗體-生物素化 BGP;OCN-酶標(biāo)-親合素復(fù)合物。經(jīng)加底物顯色后，用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）。隨著 BGP;OCN濃度的升高，OD值逐漸下降呈良好的線性關(guān)系。本試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、操作簡單、快速等特點(diǎn)，對血清中 BGP;OCN的減少或升高有可靠的檢出性能。

▎  特異性

可檢測樣本中的 BGP;OCN , 且與其它類似物無明顯交叉反應(yīng)。

▎  重復(fù)性

板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。

▎  標(biāo)曲圖

▎  批內(nèi)差

取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測，每份樣本連續(xù)測定20次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。

▎  批間差

選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值

▎  精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV（%）=SD/mean×100  CV<10% Inter-批間差: CV<13%

▎  穩(wěn)定性

經(jīng)測定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。

▎ 試劑盒的組成

▲未開封試劑盒，4℃保存；已開封，標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存，酶標(biāo)板加干燥劑后密封-20℃保存，其他4℃保存。

▎  實(shí)驗(yàn)所需自備物品

1、450±10nm濾光片酶標(biāo)儀（建議儀器使用前預(yù)熱）  

2、高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.  

3、Eppendorf 移液器.  

4、蒸餾水或去離子水.  

5、脫脂棉吸水紙.  

6、37℃恒溫箱.  

7、100ml和1000ml量筒.