高效液相色譜儀中色譜柱的維護保養(yǎng)尤為重要
閱讀:1202 發(fā)布時間:2021-1-21
高效液相色譜儀(HPLC)是分析實驗室常用的測試儀器之一,其應用越來越廣泛。此種儀器在使用過程中,難免會出現(xiàn)各種各樣的問題,并將直接影響到所測數(shù)據(jù)的準確性和儀器的正常工作。
色譜柱是高效液相色譜儀主要的部件,被測物質(zhì)能否被很好的分離和測定,色譜柱的性能起著決定性的作用。因此,在日常工作中,應特別注意色譜柱的正確使用和維修保養(yǎng),以延長色譜柱的使用壽命。
色譜柱的使用和保養(yǎng)
1、使用預柱和保護柱
預柱(pre-column)安裝于泵和進樣器之間,它給色譜柱中的流動相提供了*的平衡,并防止了對柱填料有破壞作用的組分或污染物進入色譜柱。保護柱(guardcolumn)可以阻擋能夠牢固地吸附于色譜柱上的組分進入色譜柱,保護柱應與色譜柱的填料相同。預柱和保護柱可以經(jīng)常更換,而不需要經(jīng)常更換色譜柱,這就延長了色譜柱的使用壽命。
2、防止氣體進入色譜柱
有些色譜柱(如凝膠柱)是不允許氣泡進入的,否則將會使柱效降低甚至形成微小的難以驅(qū)除的氣室。因此,為了防止氣泡進入色譜柱,一定要使用經(jīng)過脫氣的流動相,并且要嚴格按照下列步驟來安裝色譜柱。
a.拆卸下色譜柱入口處的密封螺絲,觀察是否有溶劑滲出;
b.如有溶劑滲出,即可將色譜柱接到管路上,以避免氣泡的進入;
c.如無溶劑滲出時,表明色譜柱的此端已經(jīng)進去空氣了,此時,可將色譜柱的出口端接到進樣閥上,以流動相來反方向沖洗色譜柱,以便將柱內(nèi)的空氣排除。以0.2ml/min的小流量來沖色譜柱,如果溶劑的流速太快或者是壓力突然的上升都將會導致柱性能的降低;
d.如果流出的溶劑里不含有氣泡,說明柱內(nèi)的氣體已經(jīng)被排出了,再將色譜柱以正確的方向接好,這樣氣泡就進不到色譜柱里面了。