在臨床應(yīng)用中患者經(jīng)常會(huì)同時(shí)使用多種藥物，這些藥物可能會(huì)產(chǎn)生藥物-藥物相互作用（Drug-drug interaction，DDI），最終導(dǎo)致嚴(yán)重不良反應(yīng)或減弱治療效果，因此，有必要對(duì) DDI 發(fā)生的可能及其影響程度和嚴(yán)重性進(jìn)行科學(xué)評(píng)估。藥物相互作用按照發(fā)生機(jī)制可分為理化性質(zhì)、代謝酶、轉(zhuǎn)運(yùn)體、靶點(diǎn)及疾病介導(dǎo)的相互作用，按照影響指標(biāo)可分為藥代動(dòng)力學(xué)相互作用和藥效動(dòng)力學(xué)相互作用，而開展體外試驗(yàn)就是為了全面了解在研藥物的藥代動(dòng)力學(xué)（Pharmacokinetics，PK）特征，以初步估計(jì)藥代動(dòng)力學(xué)相互作用的可能機(jī)制以及可能的嚴(yán)重程度，并支持 DDI 臨床研究時(shí)機(jī)的確定。鑒于此，IPHASE作為體外研究生物試劑引·領(lǐng)者，致力于開發(fā)CYP重組酶和ABC、SLC轉(zhuǎn)運(yùn)體產(chǎn)品，助力廣大客戶進(jìn)行人源化體外藥代動(dòng)力學(xué)及可能潛在的 DDI 研究。

一、重組酶CYP2A6/ CYP2D6

藥物代謝發(fā)生在肝臟、小腸、腎等組織中，肝臟是代謝的主要器官，其微粒體酶活性最·強(qiáng)，其中最重要的氧化酶因其在還原狀態(tài)下可與 CO 結(jié)合，在波長(zhǎng) 450 nm 處有一最大吸收峰，故認(rèn)為是細(xì)胞色素 P450 酶。位于肝臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體內(nèi)膜上的 CYP450 是參與藥物Ⅰ相代謝的關(guān)鍵酶，經(jīng)酶催化的氧化反應(yīng)是藥物體內(nèi)代謝的主要途徑，參與80%~90%藥物的Ⅰ相代謝。因此，可通過(guò)檢測(cè) CYP450 酶活性，了解藥物的體內(nèi)代謝過(guò)程，預(yù)測(cè)藥物療效和不良反應(yīng)。同時(shí)，《藥物相互作用指導(dǎo)原則2020》也指出“申請(qǐng)人應(yīng)在首·次人體試驗(yàn)之前開展體外代謝研究，鑒定主要代謝產(chǎn)物，為臨床前安全性數(shù)據(jù)外推到人體提供必要的信息，并為臨床研究設(shè)計(jì)提供參考。

鑒于此，IPHASE作為體外研究生物試劑引·領(lǐng)者，繼研發(fā)CYP2C8、CYP2C9后，再次以HEK298細(xì)胞為載體，成功構(gòu)建“CYP2A6+reductase+b5、CYP2D6+reductase+b5和CYP2D6+reductase"三種重組酶。IPHASE技術(shù)人員在4℃進(jìn)行重組酶制備，并通過(guò)不同底物的代謝產(chǎn)物生成率來(lái)驗(yàn)證重組酶的活性。即IPHASE技術(shù)人員調(diào)整重組酶終濃度為25pmol/ ml，并分別以終濃度為0.8uM的香·豆素和終濃度為0.4uM的右美沙芬為CYP2A6+reductase+b5和CYP2D6+reductase+b5、CYP2D6+reductase的底物，在37℃下將底物和重組酶共同孵育5min，結(jié)果顯示底物均有代謝，并可得到其產(chǎn)物生成率，表明“CYP2A6+reductase+b5、CYP2D6+reductase+b5和CYP2D6+reductase"這三種重組酶研發(fā)成功！

同時(shí)，為表明重組酶活性，IPHASE技術(shù)人員以相同條件，使用自研產(chǎn)品和競(jìng)品同時(shí)進(jìn)行上述試驗(yàn)，結(jié)果顯示IPHASE CYP2A6+reductase+b5、CYP2D6+reductase+b5及CYP2D6+reductase三種重組酶驗(yàn)證活性均同競(jìng)品相似或高于競(jìng)品，表明IPHASE重組酶活性較好，滿足客戶需求！

二、轉(zhuǎn)運(yùn)體OATP1B1/OATP1B3

轉(zhuǎn)運(yùn)體在人體全身組織中均有表達(dá)，通過(guò)影響藥物的吸收、分布和消除而影響藥物的藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)特征。根據(jù)功能可將轉(zhuǎn)運(yùn)體分為攝入型轉(zhuǎn)運(yùn)體（SLC）和外排型轉(zhuǎn)運(yùn)體（ABC）。OATP1B1和OATP1B3屬于SLC家族，是肝細(xì)胞竇狀隙膜上表達(dá)的主要攝取轉(zhuǎn)運(yùn)體，在多種藥物的肝臟攝取中發(fā)揮重要作用。OATP1B1、OATP1B3的底物眾多，很多在結(jié)構(gòu)上不相關(guān)的藥物也會(huì)經(jīng)由其轉(zhuǎn)運(yùn)，因此，在體外研究其與化合物的關(guān)系至關(guān)重要！目前已明確屬于OATP1B1及OATP1B3的底物、抑制劑及誘導(dǎo)劑如下所示：

基因符號(hào)-SLCO1B1

底物：阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅舒伐他汀、辛伐他汀酸、依那普利、非索非那定、甲氨蝶呤、纈沙坦、波生坦、奧美沙坦、阿曲生坦、利福平、SN-38、伊立替康、頭孢托侖、瑞格列奈、西羅莫司、殺奎那韋、洛匹那韋、頭孢哌酮、頭孢唑林及托拉塞米;

抑制劑:環(huán)孢素、吉非貝齊、利福平、羅紅霉素、泰利霉素、利托那韋、殺奎那韋、奈非那韋、西·地那·非、阿托伐他汀酸、辛伐他聽、辛伐他汀酸、阿托伐他汀酯、洛伐他汀、洛伐他汀酸、格列本脲、貫葉金絲桃素、紫杉醇、瑞格列奈、替米沙坦、他克莫司、曲格列酮;

誘導(dǎo)劑:雙氯芬酸、布洛芬、羅美昔布;

基因符號(hào)-SLCO1B3

底物：波生坦、地·高辛、依那普利、紅霉素、非索非那定、氟伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅舒伐他汀、利福平、奧美沙坦、替米沙坦、阿曲生坦、纈沙坦、伊馬替尼、甲氨蝶呤、紫杉醇、多烯紫杉醇、CCK-8、頭孢拉定、頭孢唑林、頭孢美唑、頭孢托侖、頭孢氨芐、萘夫西林;

抑制劑:環(huán)孢素、利福平、紅霉素、羅紅霉素、克拉霉素、泰利霉素;

誘導(dǎo)劑:雙氯芬酸、布洛芬、羅美昔布;

資料來(lái)源：有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽OATP1B1、OATP1B3 的基因多態(tài)性及其介導(dǎo)的藥物相互作用研究進(jìn)展

鑒于此，IPHASE繼成功研發(fā)轉(zhuǎn)運(yùn)體MATE2-K、OAT1、OAT3和OCT2后，再次以HEK293為細(xì)胞載體，成功構(gòu)建瞬時(shí)轉(zhuǎn)染重組OATP1B1、OATP1B3轉(zhuǎn)運(yùn)體。IPHASE技術(shù)人員以終濃度為1 μM的普伐他汀鈉（Deoxycholic acid， sodium salt）為底物，通過(guò)LC-MS/MS檢測(cè)空載細(xì)胞HEK293和轉(zhuǎn)運(yùn)體細(xì)胞OATP1B1、OATP1B3細(xì)胞對(duì)普伐他汀鈉的代謝能力，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)運(yùn)體細(xì)胞OATP1B1底物代謝量為HEK293細(xì)胞底物代謝量的13倍，OATP1B3則為34倍！均遠(yuǎn)高于《藥物相互作用指導(dǎo)原則2020》規(guī)定的2倍，表明OATP1B1和OATP1B3轉(zhuǎn)運(yùn)體細(xì)胞模型構(gòu)建成功！

三、IPHASE相關(guān)產(chǎn)品

除了最新研發(fā)的重組酶CYP2A6和轉(zhuǎn)運(yùn)體OATP1B1、OATP1B3細(xì)胞，IPHASE作為體外研究生物試劑引·領(lǐng)者，相繼開發(fā)出了多種重組酶及轉(zhuǎn)運(yùn)體細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品，助力廣大客戶體外研究。

IPHASE/匯智和源憑借多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，推出了多領(lǐng)域、多種類的高·端科研試劑，為藥物早期研發(fā)提供篩選工具，為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供新材料、新方法和新手段，為食品、藥品、化學(xué)品等的遺傳毒性研究提供便捷產(chǎn)品，望廣大科研工作者咨詢。

發(fā)    文    章    得    獎(jiǎng)    勵(lì)

凡使用本公司產(chǎn)品，在國(guó)內(nèi)及國(guó)際刊物上發(fā)表論文（論文發(fā)表日起一年內(nèi)），并注明產(chǎn)品屬于IPHASE BIOSCIENCES Co.,Ltd. / 匯智和源生物技術(shù)（蘇州）有限公司所有，即可申請(qǐng)獎(jiǎng)勵(lì)。根據(jù)發(fā)表刊物影響因子不同，給予不同金額獎(jiǎng)品：

非SCI論文及IF≤5分，500元禮品；

5分＜IF≤8分 800元；

8分＜IF≤10分 1000元；

IF≥10分 2000元；

注：禮品卡也可兌換同等金額產(chǎn)品購(gòu)買抵用券；

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匯智和源，致力于為創(chuàng)新藥研發(fā)企業(yè)及生命科學(xué)研究機(jī)構(gòu)提供高品質(zhì)的生物試劑，IPHASE為公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research"。