細(xì)胞體積測定系統(tǒng)-實(shí)時(shí)跟蹤貼壁細(xì)胞的細(xì)胞體積

 

讀出
細(xì)胞體積，離子泵

標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)限制
有幾種生理和病理過程，其中細(xì)胞經(jīng)歷體積變化。 但是，沒有可靠的方法可用于實(shí)時(shí)準(zhǔn)確地測量貼壁細(xì)胞的體積。

細(xì)胞體積評估的好處
將細(xì)胞培養(yǎng)在光學(xué)透明的腔室中，該腔室可以準(zhǔn)確地確定其隨時(shí)間的體積，并可以并行跟蹤負(fù)責(zé)體積變化的生化過程，例如激活離子泵。
例子
從相間階段到Raji細(xì)胞有絲分裂的體積追蹤[2]。

 

A）HeLa細(xì)胞的體積軌跡。 在開始和結(jié)束時(shí)兩個(gè)體積過沖對應(yīng)于有絲分裂的瞬時(shí)體積增加，其中地一個(gè)對應(yīng)于母細(xì)胞，第二個(gè)對應(yīng)于子細(xì)胞。

（B）（A）中具有FXm的細(xì)胞的原始熒光圖像。 比例尺50毫米。

（A）將細(xì)胞放置在由FITC-Dextran補(bǔ)充的培養(yǎng)基中，其高度由立柱設(shè)定，其高度已校準(zhǔn)到聚二甲基硅氧烷中。 底部圖片：細(xì)胞在熒光圖像上排除了熒光（比例尺為20 mm）。

（B）與（A）中的虛線相對應(yīng)的熒光輪廓：熒光強(qiáng)度的大值和小值分別對應(yīng)于腔室的大高度（背景）和零高度（支柱）。 右：這些值用于校準(zhǔn)信號并計(jì)算細(xì)胞的光學(xué)厚度。

（C）后，通過積分整個(gè)細(xì)胞區(qū)域的總熒光強(qiáng)度來獲得細(xì)胞體積。

 

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細(xì)胞限制器再現(xiàn)了正常情況下細(xì)胞在體內(nèi)所處的條件：它們被限制。 它使您可以控制細(xì)胞的厚度和
細(xì)胞培養(yǎng)的體積。 通過非破壞性方法，您可以定義培養(yǎng)物的體積以及施加在細(xì)胞上的比壓力。 這構(gòu)成了培養(yǎng)觸發(fā)仿生的細(xì)胞的新的和相關(guān)的系統(tǒng)。

●細(xì)胞被均勻地限制/壓縮在兩個(gè)亞微米分辨率的兩個(gè)平行表面之間。
●不同的限制高度（例如1um – 300um）
●可放入培養(yǎng)箱內(nèi)長期培養(yǎng)：允許長期細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞增殖，同時(shí)保持對封閉的控制
●高分辨率成像分析：與高分辨率光學(xué)顯微鏡系統(tǒng)兼容
●可以處理足夠多的細(xì)胞以進(jìn)行完整的基因表達(dá)分析
●微圖案和幾何形態(tài)控制：可與生物功能化的微結(jié)構(gòu)化底物和/或不同微圖案的基質(zhì)（幾何形狀控制）結(jié)合使用
●基底剛度控制：可以與凝膠結(jié)合進(jìn)行基底剛度控制（1-200Kpa）
●兼容任何細(xì)胞培養(yǎng)底物（培養(yǎng)皿至96孔板）