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技術(shù)文章

細(xì)胞周期檢測科研實驗技術(shù)服務(wù)介紹

閱讀:29          發(fā)布時間:2024-9-19
細(xì)胞周期檢測


應(yīng)用簡介
       細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時離開細(xì)胞周期,停止細(xì)胞分裂,執(zhí)行一定生物學(xué)功能(G0期)。由于細(xì)胞周期各時相的DNA含量不同,通常正常細(xì)胞的G1/ G0期具有二倍體細(xì)胞的DNA含量(2N),而G2/ M期具有四倍體細(xì)胞的DNA含量(4N),而S期的DNA含量介于二倍體和四倍體之間。
技術(shù)原理
       PI可以與DNA結(jié)合,其熒光強度直接反映了細(xì)胞內(nèi)DNA含量。因此,通過流式細(xì)胞儀PI染色法對細(xì)胞內(nèi)DNA含量進行檢測時,可以將細(xì)胞周期各時相區(qū)分為G1/G0期,S期和G2/M期。
實驗方法

注意事項
        細(xì)胞周期檢測時,一定不要洗滌。不同于蛋白染料和細(xì)胞之間的牢固結(jié)合,DNA與染料的結(jié)合是一種結(jié)合態(tài)和游離態(tài)之間松散的平衡,不是很牢固,所以洗滌步驟會造成染料丟失,降低核酸的特異性熒光,造成測量值變小。
 


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