技術(shù)文章
CHIP 檢測科研實驗技術(shù)服務(wù)介紹
閱讀:93 發(fā)布時間:2024-9-20CHIP 檢測
應(yīng)用簡介
核酸和蛋白質(zhì)是組成生命的主要生物大分子,兩者的相互作用是構(gòu)成生命活動的生長、繁殖、運動、遺傳和代謝等生命活動的基礎(chǔ)。研究蛋白質(zhì)和核酸間的相互作用是人們探索生命現(xiàn)象奧秘的關(guān)鍵,CHIP檢測實驗是應(yīng)用于蛋白與核酸互作關(guān)系的重要參考。
技術(shù)原理
CHIP實驗在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物,并將其隨機(jī)切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段,然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體,特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段,通過對目的片斷的純化與檢測,從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。
實驗方法

1、細(xì)胞樣本所需數(shù)量較大,需要提前按照所需細(xì)胞的要求整理,保證細(xì)胞所需量達(dá)到要求。
2、染色質(zhì)消化過程需要調(diào)整,以獲得更好的消化時間,需要進(jìn)行相關(guān)梯度摸索。
3、不同細(xì)胞的處理時間和細(xì)胞數(shù)目會有差異,需要進(jìn)行調(diào)整。
4、部分抗體級別可能達(dá)不到CHIP級別的要求,需要采購對應(yīng)級別的抗體并通過陰陽性實驗反饋結(jié)果可信性。部分特異染色質(zhì)檢測靶序列可能無法在一次擴(kuò)增中獲得較好的結(jié)果,需要不斷調(diào)整引物。