技術(shù)文章
血管生成實驗科研實驗技術(shù)服務介紹
閱讀:20 發(fā)布時間:2024-9-24應用簡介
血管生長是腫瘤發(fā)生的關(guān)鍵步驟。無論原發(fā)性腫瘤還是繼發(fā)性腫瘤,一旦生長直徑超過1~2mm,都會有血管生成,這是由于腫瘤細胞自身可分泌多種生長因子,誘導血管生成。多數(shù)惡性腫瘤的血管生成密集且生長迅速,因此,血管生成在腫瘤的發(fā)展轉(zhuǎn)移過程中起到重要作用,抑制這一過程將能明顯阻止腫瘤組織的發(fā)展和擴散轉(zhuǎn)移。體外的血管生成實驗能很好的模擬腫瘤的血管發(fā)生過程,并且適合研究藥物對這一過程的影響。
技術(shù)原理
應用Matrigel模擬機體環(huán)境,上面接種腫瘤細胞,觀察血管生成情況。
實驗方法
技術(shù)總結(jié)
1、實驗前一天需要將Matrigel置于冰盒,放入冰箱中,同時需要準備一些預冷的槍頭用于吸取Matrigel膠;
2、將Matrigel膠加到血管生成載玻片時注意槍頭要垂直于內(nèi)孔的正上方加入Matrigel,防止有Matrigel流經(jīng)上孔而留下殘留膠;
3、需要按照細胞的生長速度定時采集圖像,并且對其成管長度、覆蓋面積、成環(huán)數(shù)和結(jié)點進行測量和記錄,并且對其進行統(tǒng)計分析;
4、分上下孔的ibidi血管生成載玻片能去除凹液面,使成像效果更好。
5、腫瘤血管生成是一個極其復雜的過程,一般包括包括血管內(nèi)皮基質(zhì)降解、內(nèi)皮細胞移行、內(nèi)皮細胞增殖、內(nèi)皮細胞管道化分支形成血管環(huán)和形成新的基底膜等步驟。腫瘤血管生成的發(fā)生一方面是由于腫瘤
細胞釋放血管生成因子激活血管內(nèi)皮細胞,促進內(nèi)皮細胞的增殖和遷移,另外一方面也是因為內(nèi)皮細胞旁分泌某些血管生長因子刺激腫瘤細胞的生長。腫瘤細胞和內(nèi)皮細胞的相互作用自始至