雙熒光素酶檢測實驗

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　　一、實驗介紹

　　通過螢光素酶和其底物這一生物發(fā)光體系，可以非常靈敏、高效地檢測基因的表達(dá)。通常把感興趣基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或5’啟動子區(qū)克隆在luciferase的上游，或把3’-UTR區(qū)克隆在luciferase的下游等，構(gòu)建成報告基因(reporter gene)質(zhì)粒。然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞，用適當(dāng)藥物等處理細(xì)胞后裂解細(xì)胞，測定螢光素酶活性。通過螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。Renilla luciferase相對更多地被用作轉(zhuǎn)染效率的內(nèi)參，以消除細(xì)胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染效率的差異。

　　

二、實驗?zāi)康?/span>

　　1．檢測基因靶向性；

　　2．檢測啟動子調(diào)控。

　　

三、實驗步驟

　　

四、實驗結(jié)果展示

　　我司使用的雙熒光素酶載體，以螢火蟲熒光素酶為內(nèi)參

　　

五、送樣運輸要求：

　　活細(xì)胞樣本常溫運輸，細(xì)胞信息，不接收凍存樣本。