Optical Stretcher-細(xì)胞力學(xué)成像流式細(xì)胞儀
細(xì)胞力學(xué)成像流式細(xì)胞儀該系統(tǒng)是一套基于微流控流體壓力梯度的、在倒置顯微鏡的擴(kuò)展起來的、集成流式細(xì)胞儀特性、熒光檢測(cè)模塊、溫控模 塊、高速成像和數(shù)據(jù)采集分析軟件的高通量單細(xì)胞實(shí)時(shí)形變測(cè)量和單細(xì)胞力學(xué)性質(zhì)分析系統(tǒng)。 是一種以流式細(xì)胞儀的速度檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞形態(tài)和力學(xué)性質(zhì)的技術(shù),每個(gè)細(xì)胞都被實(shí)時(shí)拍攝、分析和成像存儲(chǔ)。
優(yōu)勢(shì)亮點(diǎn):
- 機(jī)械力學(xué)作為一種新的生物標(biāo)志物--溫和無損傷
- 無標(biāo)記
- 非破壞性的力量
- 高速測(cè)量單個(gè)細(xì)胞的實(shí)時(shí)形變(高度、寬度、面積、比例)、高度偏差、環(huán)度衡量比、孔度、亮度、楊氏模量等
- 細(xì)胞機(jī)械特性測(cè)量高通量(1000細(xì)胞/秒)
- 配有高速成像、熒光檢測(cè)、溫控模塊
- 不需要細(xì)胞分離/純化
- 文獻(xiàn)量大、級(jí)別高文章達(dá)數(shù)十篇
實(shí)時(shí)形變
成像
每個(gè)細(xì)胞被同時(shí)拍照、分析和儲(chǔ)存。 這允許通過它們的光學(xué)特性來找到小亞群或區(qū)分細(xì)胞。 另外可以研究像表面拓?fù)浠蚣?xì)胞對(duì)光的衰減的形態(tài)特性。
- 每個(gè)獲取圖像的存儲(chǔ)
- 快速訪問細(xì)胞大小和形態(tài)
流式細(xì)胞技術(shù)
細(xì)胞通過微流通道時(shí),提取細(xì)胞變形、亮度和大小等參數(shù),同時(shí)。 這允許實(shí)時(shí)地研究細(xì)胞屬性。
可溫控和熒光檢測(cè)
實(shí)時(shí)變形細(xì)胞計(jì)數(shù)和同時(shí)熒光檢測(cè):
- 熒光模塊使得該系統(tǒng)不再只是附加了一個(gè)額外的細(xì)胞力學(xué)檢測(cè)通道的流式細(xì)胞儀。它成為了生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室的得力工具 - 提供了更多視角來解決科學(xué)問題。在生物學(xué)研究中通常使用熒光流式細(xì)胞儀來鑒定和定量細(xì)胞和細(xì)胞過程。使該系統(tǒng)集熒光流式細(xì)胞儀和實(shí)時(shí)變形的優(yōu)點(diǎn)于一身,形成了實(shí)時(shí)熒光形變細(xì)胞儀。光片激發(fā)設(shè)計(jì)可實(shí)現(xiàn)三通道1D熒光成像。除了所有實(shí)時(shí)變形參數(shù)外,系統(tǒng)還會(huì)分析熒光信號(hào)實(shí)時(shí)得到峰圖,速度可達(dá)每秒1000個(gè)細(xì)胞。也可在實(shí)驗(yàn)后處理保存的原始熒光數(shù)據(jù),以針對(duì)特定的問題和需 求修改處理方法。
1)根據(jù)表面marker鑒定血細(xì)胞:
熒光模塊可檢測(cè)和鑒定同一樣品中的三種不同熒光。利用標(biāo)記的表面熒光蛋白可同時(shí)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞鑒定和力學(xué)性質(zhì)及形態(tài)性質(zhì)測(cè)量。 下圖為 G-CSF動(dòng)員的外周血樣品細(xì)胞群體。 標(biāo)記后的細(xì)胞表面markers CD3-FITC (T-cells), CD34-PE (造血干細(xì)胞)和CD14-APC(單核細(xì)胞)熒光強(qiáng)度檢測(cè) 揭示了各細(xì)胞類型所具有的不同力學(xué)性質(zhì)。 - 2)一維熒光成像:
熒光模塊在激發(fā)光路徑中產(chǎn)生一束受限光片,穿過流道,細(xì)胞會(huì)經(jīng)過一束很窄的激發(fā)光幕。這樣可以進(jìn)行1D熒光成像,例如可用于解析沿流動(dòng)方向的熒光標(biāo)記結(jié)構(gòu)的側(cè)向分布。檢測(cè)到的熒光峰值帶有很多重要信息。熒光標(biāo)記的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)(如細(xì)胞核)會(huì)顯示窄峰,而胞質(zhì)會(huì)顯示出更寬的峰。不同分裂期細(xì)胞中標(biāo)記的組蛋白也會(huì)呈現(xiàn)出不同的峰圖.
加熱模塊 - 溫度控制
加熱模塊實(shí)現(xiàn)了生理溫度下的測(cè)量。加熱模塊帶有一個(gè)300 W的加熱器和幾個(gè)靜默通風(fēng)機(jī)來有效混合熱空氣??拷鼧悠诽幱幸粋€(gè)傳感器和一個(gè)控制單元,用以地將溫度控制在所需值。系統(tǒng)的空氣循環(huán)系統(tǒng)非常高效,當(dāng)進(jìn)行開放操作(如更換樣品)后可以迅速恢復(fù)溫度。
高速攝像
該成像模塊是款高速明場(chǎng)攝像顯微鏡,使用同步化微秒高強(qiáng)度LED光源減輕運(yùn)動(dòng)模糊,可進(jìn)行極慢運(yùn)動(dòng)攝影.每秒可記錄500幅全幀圖像或10000幀小區(qū)域圖像