詳細介紹
DNA Flow Cytometry Reagents試劑ECT0011.0
DNA Flow Cytometry Reagents試劑ECT0011.0
細胞活力染色:一步,即可使用。使用碘化丙啶,可通過膜滲透快速殺死死細胞。
用于流式細胞術(shù)的DNA標準:基于鱒魚紅細胞(TRBC)的DNA標準,該標準無毒且針對流式細胞術(shù)進行了優(yōu)化。
核隔離培養(yǎng)基(NIM):從細胞,組織,凍融的組織或脫脂的/酶分離的組織中分離完整的細胞核。
技術(shù)指標
產(chǎn)品類別: | 緩沖液或化學藥品 |
名稱: | 流式細胞術(shù)的細胞活力StainDNA標準核分離培養(yǎng)基(NIM) |
量: | 細胞活力染色:10mL(100個反應)DNA流式細胞分析標準液:5mL的1-2 x 106 TRBC / mL(100個反應)核分離培養(yǎng)基(NIM):100mL(100個反應) |
存儲: | 4C |
發(fā)貨: | 冰袋 |
文獻資料
建議的協(xié)議
細胞生存力染色劑:將100uL細胞生存力染色劑與100uL細胞以1x10 ^ 5-1x10 ^ 6細胞/ mL的比例混合)
用于流式細胞術(shù)的DNA標準液:以1-2x10 ^ 6細胞/ mL的濃度將50uL的DNA標準液添加到1mL的細胞中。離心成沉淀并重懸于僅NIM(定制染色),NIM-DAPI或NIM-PI中。或者,可以將部分DNA標準品和細胞直接添加到1 mL NIM溶液中,并進行染色,無需離心。分析前,應將懸浮液在冰或室溫下放置2-3分鐘。
核分離培養(yǎng)基(NIM):與DNA標準品(參見上文)一起,將離心沉淀重懸于100uL僅NIM(用于定制染色),NIM-DAPI或NIM-PI中?;蛘?,可以將部分DNA標準品和細胞直接添加到1 mL NIM溶液中,并進行染色,無需離心。分析前,應將懸浮液在冰或室溫下放置2-3分鐘。
數(shù)據(jù)
具有TRBC DNA標準和核隔離介質(zhì)(NIM-DAPI)的扁桃體
將DNA標準品與NIM-DAPI混合,并通過37µm過濾器過濾。用于建立流式細胞儀的DNA標準在CV = 1-2%的范圍內(nèi)運行。其次,在樣品運行期間,DNA標準品在通道50(約5.0 pg /核)處達到峰值。通過使用人類扁桃體確定CV = 2-3%,G0扁桃體核的相對DNA值為7.4 pg /核,使用通道50中的位置來確保對位酶起作用。對照石蠟化的人扁桃體組織也進行了脫蠟和酶解,以確保PARA試劑功能正常。每次確定良性和癌性組織的DNA直方圖測量值時,所有扁桃體對照均為CV = 2-3%。另外,所有DNA標準樣品的CV = 1-2%。(A)典型的DNA標準鱒魚紅細胞(TRBC)值。CV = 1.42±0.19SD,n = 66。(B)具有DNA標準的人類扁桃體。22個樣品的數(shù)據(jù)得出的平均變異系數(shù)為2.18±0.46 SD,平均DNA指數(shù)為1.42±0.03 SD,平均S相分數(shù)為4.37±1.37 SD。
改編自: Thornthwaite,JT等。J.實體瘤3:12-23(2013)。
提供者
來自西田納西州癌癥研究所