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技術(shù)文章

細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹

閱讀:46          發(fā)布時(shí)間:2024-9-20
細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)


應(yīng)用簡(jiǎn)介
       克隆形成及細(xì)胞克隆接種存活率,通過(guò)觀察單細(xì)胞集落形成情況,來(lái)計(jì)算克隆形成率,了解其增殖能力。
技術(shù)原理
       單個(gè)細(xì)胞在體外持續(xù)增殖6代以上時(shí)細(xì)胞數(shù)量已達(dá)60個(gè)左右,此細(xì)胞群體成為克隆或集落,大小在1.0-2.0mm之間。集落形成率表示細(xì)胞的獨(dú)立生存能力,各種理化因素可能導(dǎo)致細(xì)胞的克隆形成能力發(fā)生改變,通過(guò)計(jì)數(shù)克隆形成率,可對(duì)單個(gè)細(xì)胞的增殖潛力做定量分析,了解細(xì)胞的增殖率和對(duì)生存環(huán)境的適應(yīng)性。軟瓊脂培養(yǎng)或平板克隆是zui常用的方法。
實(shí)驗(yàn)方法

技術(shù)總結(jié)
       1、試驗(yàn)成功的關(guān)鍵是細(xì)胞懸液的制備和接種密度。細(xì)胞一定要分散得好,不能有細(xì)胞團(tuán),接種密度不能過(guò)大。
       2、細(xì)胞在進(jìn)行克隆形成實(shí)驗(yàn)時(shí)要求有95%以上的分散度,否則結(jié)果的準(zhǔn)確度會(huì)受到很大影響。
       3、克隆形成率公式:克隆形成率=(克隆數(shù)/接種細(xì)胞數(shù))×100%,細(xì)胞克隆形成率即細(xì)胞接種存活率,表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞成活并形成克隆的數(shù)量。
       4、一般初代培養(yǎng)細(xì)胞克隆形成率弱,傳代細(xì)胞系強(qiáng);二倍體細(xì)胞克隆形成率弱,轉(zhuǎn)化細(xì)胞系強(qiáng);正常細(xì)胞克隆形成率弱,腫瘤細(xì)胞強(qiáng)。


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