細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)

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一、實(shí)驗(yàn)介紹

　　細(xì)胞克隆形成率即細(xì)胞接種存活率，表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞成活并形成克隆的數(shù)量。貼壁后的細(xì)胞不一定每個都能增殖和形成克隆，而形成克隆的細(xì)胞必為貼壁和有增殖活力的細(xì)胞。克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。

　　

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

　　1）通過對細(xì)胞處理后在細(xì)胞培養(yǎng)板上的克隆形成能力來提示處理后細(xì)胞的群體依耐性及增殖能力。

　　2）評價(jià)不同殺傷因素(藥物、基因等)對腫瘤細(xì)胞增殖能力或群體依賴性的敏感性;

　　3）評價(jià)細(xì)胞在體內(nèi)成瘤性，癌細(xì)胞不一定都可以在體內(nèi)成瘤，但若體外克隆能力越強(qiáng)，即表明體內(nèi)成瘤性越強(qiáng)，算是一種模擬體內(nèi)成瘤的體外實(shí)驗(yàn)。

　　

三、實(shí)驗(yàn)步驟

　　

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示

　　

 

五、送樣運(yùn)輸要求：

 

1 凍存細(xì)胞

凍存管寄送前，使用封口膜把凍存管口封嚴(yán)密，凍存管單獨(dú)用自封袋存放。干冰運(yùn)輸。運(yùn)輸時間在2天以內(nèi)干冰用量在10kg，在2-4天，干冰用量在20kg。

2 活細(xì)胞

1. 使用T25瓶，瓶蓋無孔。

2. 生長狀態(tài)良好的細(xì)胞，細(xì)胞密度在30%-40%為宜，寄送前，移去瓶內(nèi)舊培養(yǎng)基，添加新培養(yǎng)基至瓶頸部，保留微量空氣，擰緊瓶蓋，并用封口膜密封，瓶身用75%表面消毒，把瓶用無菌袋或自封袋包裝，然后放置在適當(dāng)?shù)暮袃?nèi)，盒周圍用棉花等做防震防壓處理。當(dāng)溫度低于10度是要加保溫措施，如暖寶寶等。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)條件備注完整，如培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度，FBS用量等。

4. 備注：運(yùn)送時間原則在4天以內(nèi)，如細(xì)胞生長速度快，則加入的培養(yǎng)基血清可以減半，細(xì)胞密度在20%-30%。