原位末端凋亡（TUNEL)實驗

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一、實驗介紹

　　TUNEL技術(shù)可對組織或細(xì)胞中凋亡小體或單個凋亡細(xì)胞進(jìn)行染色，能準(zhǔn)確反映細(xì)胞凋亡最典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征。

　　凋亡細(xì)胞內(nèi)內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活而將自身染色體DNA切斷成缺口或3-OH末端片段這一特點,利用脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶將標(biāo)有標(biāo)記物(如di高辛,生物素或熒光素)的脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移到3-OH末端,再用免疫組化法或免疫熒光檢測凋亡細(xì)胞。

　　

二、特點及適用范圍

　　組織學(xué)、胚胎學(xué)、生物學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研。

　　

三、TUNEL細(xì)胞凋亡檢測實驗步驟

　　（熒光）組織脫水-組織透明-浸蠟-包埋-切片和烤片-切片脫蠟-蛋白酶K修復(fù)-破膜通透-孵育tunel反應(yīng)液-DAPI染核-抗熒光素淬滅劑封片-鏡檢拍照

　?。ò坠猓┙M織脫水-組織透明-浸蠟-包埋-切片和烤片-切片脫蠟-蛋白酶K修復(fù)--破膜通透-孵育tunel反應(yīng)液-孵育Streptavidin-HRP反應(yīng)液-DAB顯色-蘇木素染核-脫水封片-鏡檢拍照

　　

四、實驗結(jié)果展示

　　

 

五、送樣運輸要求：

　　樣本放置于5倍樣本體積的4%多聚甲醛固定液中固定24h以上，常溫運輸送樣。切勿固定時間過長，切勿冷凍結(jié)冰。