詳細介紹
µ-Dish 35毫米,高生物惰性 現貨
µ-Dish 35毫米,高生物惰性 現貨
應用范圍:
- 沒有支架的球體和類器官的生成和長期培養(yǎng)
- 懸浮體中的類器官,球體,類胚體(EB)和細胞的高分辨率熒光顯微鏡
- 細胞間相互作用的無背景分析
- 防止由于附著引起的干細胞分化
- 未附著狀態(tài)的懸浮細胞培養(yǎng)
- 自組裝腫瘤球形成測定
- 3D腫瘤球體模型
技術特點
- µ-Dish 35毫米,高,具有非粘附性,鈍化的生物惰性表面
- 無需事先表面處理或準備即可使用
- 200 nm親水性多元醇水凝膠-穩(wěn)定且共價鍵合
- 沒有蛋白質,抗體,酶和其他生物分子的吸附,包被或結合
- 與所有固定劑和染色液兼容
- 無自發(fā)熒光
- 無細胞毒性,生物惰性,不可降解
- 與浸油兼容
規(guī)格:
Ø微盤 | 35毫米 |
體積 | 2毫升 |
生長面積 | 3.5厘米2 |
Ø觀察區(qū) | 21毫米 |
帶蓋/不帶蓋的高度 | 14/12毫米 |
底部:具有生物惰性表面的ibidi聚合物蓋玻片 | |
生物惰性表面厚度 | 200納米 |
生物惰性表面材料 | 多元醇基水凝膠 |
蛋白質涂層 | 不可能 |
生物惰性表面技術背后的原理
沒有細胞附著
生物惰性表面是與ibidi Polymer Coverslip#1.5共價結合的薄的多元醇水凝膠層。與標準的超低附著力(ULA)涂層相反,Bioinert*不粘附,即使在長期實驗中也不允許任何生物分子的結合。因此,Bioinert技術在基于細胞的測定中提供了幾天甚至幾周的穩(wěn)定鈍化。
沒有細胞-底物相互作用
Bioinert創(chuàng)造了一種環(huán)境,在該環(huán)境中,細胞與細胞之間的相互作用比細胞與底物之間的相互作用更為重要。實際上,后者被*阻止了。Bioinert表面的穩(wěn)定性允許在同一盤上進行數天甚至數周的長期實驗,而不會粘附任何蛋白質。即使您的細胞需要胎牛血清濃度高的培養(yǎng)基,Bioinert也會阻止任何細胞或蛋白質粘附到表面。
沒有事先準備
生物惰性表面隨時可用。無需任何預水合步驟。一旦被緩沖液或細胞培養(yǎng)基浸濕,表面將自行膨脹。
無自發(fā)熒光
ibidi Polymer Coverslip的扁平,薄底材料和出色的光學質量均可以實現高分辨率顯微鏡,而不會產生破壞性的自發(fā)熒光。
ibiTreat,未涂覆和生物惰性的表面比較
ibiTreat
優(yōu)異的細胞粘附力
- 貼壁細胞培養(yǎng)
- 可能有ECM涂層
親水的ibiTreat表面即使在沒有明確的蛋白質涂層的情況下也能提供出色的細胞粘附性。但是,ECM蛋白包衣可以在ibiTreat上完成,沒有任何限制。ibiTreat表面非常適合培養(yǎng)不需要任何特殊涂層的貼壁細胞。
無涂層
弱細胞粘附
- 貼壁細胞培養(yǎng)
- 可能有ECM涂層
疏水的未涂層表面如果以前未使用ECM蛋白涂層,則細胞粘附力較弱。ECM蛋白包衣可以在未包被的表面上進行,沒有任何限制。未經涂層的表面非常適合培養(yǎng)需要特定涂層的貼壁細胞。
生物惰性
無細胞粘附
- 懸浮細胞,細胞聚集體,球體,胚狀體(EB),類器官的培養(yǎng)
- 無法使用ECM涂層
親水性生物惰性表面會阻礙任何蛋白質附著,從而抑制后續(xù)的細胞附著。與ibiTreat和未涂層表面不同,不可能進行涂層。生物惰性表面非常適合培養(yǎng)懸浮細胞和細胞聚集體。
應用示例:使用生物惰性表面的球狀培養(yǎng)和3D投影
使用基于瓊脂糖的液體覆蓋技術從HT-1080 LifeAct細胞系中生成球狀體,然后將其轉移到35毫米高生物惰性的μ-Dish 顯微鏡中。
HT-1080 LifeAct橢球體的共聚焦激光掃描圖像。該圖像是一系列共焦部分的投影。彩虹色標度表示與蓋玻片表面的距離。暖色=靠近表面,冷色=遠離表面。
應用示例:使用生物惰性表面的球狀培養(yǎng)和FDA / PI染色
Bioinert表面非常適合球體和類器官的短期和長期3D培養(yǎng)。由于特異性和非特異性細胞的固定均被抑制,因此細胞被迫進入懸浮狀態(tài)??,從而能夠形成大小球體。為了評估生存力,使用標記活細胞的雙乙酸熒光素(FDA)和染色死細胞的碘化丙啶(PI)對細胞染色。
有關FDA / PI染色的更多詳細信息,請參閱我們的應用筆記33,使用FDA和PI進行活/死染色(PDF)。
HepG2橢球體的共聚焦激光掃描部分。HepG2細胞的球狀體是用基于瓊脂糖的液體覆蓋技術生成的,然后轉移到35毫米高生物活性的µ-Dish中。FDA(綠色)表示在球形外層的活細胞。PI(紅色)標記壞死球體中心內的死細胞。比例尺為200 µm。
通過液體覆蓋法生成不同細胞系的球狀體,并將其轉移到35毫米的高密度碟中,用于FDA / PI染色和活細胞成像。
HepG2球體
HT1080橢球
HUVEC橢球
MCF7球體
如圖所示,FDA / PI染色的活細胞寬視野熒光成像可區(qū)分不同的細胞類型。FDA(綠色)表示在球形外層的活細胞。PI(紅色)標記壞死球體中心內的死細胞。注意不同的球體形態(tài),這取決于細胞類型。
FDA-PI染色的MCF-7細胞球的正視圖和側視圖。共聚焦激光掃描圖像是從FDA信號的連續(xù)共聚焦部分的覆蓋圖投影而來的。比例尺為100 µm。
應用實例:培養(yǎng)不同表面的貼壁細胞
μ-盤35mm時,高生物惰性適用于各種貼壁細胞類型的培養(yǎng)(參見下圖)。
在ibiTreat表面上,所有貼壁細胞類型都顯示出很強的細胞貼壁性。由于只有血清蛋白涂層,因此在未涂層的表面上觀察到較弱的細胞粘附。在生物惰性表面上,細胞根本不附著,在大多數細胞類型中都可以觀察到球體形成。取決于特定細胞類型的細胞-細胞粘附,球體或多或少均勻地形成。
將不同類型的貼壁細胞分別接種在ibiTreat,未包被和Bioinert表面上。在沒有事先ECM蛋白包被的*生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞。播種后24小時拍攝圖像。相差顯微鏡,比例尺為300 µm。
注:楊清辰發(fā)布