詳細(xì)介紹
µ-Dish 35毫米,高生物惰性 現(xiàn)貨
µ-Dish 35毫米,高生物惰性 現(xiàn)貨
應(yīng)用范圍:
- 沒有支架的球體和類器官的生成和長期培養(yǎng)
- 懸浮體中的類器官,球體,類胚體(EB)和細(xì)胞的高分辨率熒光顯微鏡
- 細(xì)胞間相互作用的無背景分析
- 防止由于附著引起的干細(xì)胞分化
- 未附著狀態(tài)的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
- 自組裝腫瘤球形成測(cè)定
- 3D腫瘤球體模型
技術(shù)特點(diǎn)
- µ-Dish 35毫米,高,具有非粘附性,鈍化的生物惰性表面
- 無需事先表面處理或準(zhǔn)備即可使用
- 200 nm親水性多元醇水凝膠-穩(wěn)定且共價(jià)鍵合
- 沒有蛋白質(zhì),抗體,酶和其他生物分子的吸附,包被或結(jié)合
- 與所有固定劑和染色液兼容
- 無自發(fā)熒光
- 無細(xì)胞毒性,生物惰性,不可降解
- 與浸油兼容
規(guī)格:
Ø微盤 | 35毫米 |
體積 | 2毫升 |
生長面積 | 3.5厘米2 |
Ø觀察區(qū) | 21毫米 |
帶蓋/不帶蓋的高度 | 14/12毫米 |
底部:具有生物惰性表面的ibidi聚合物蓋玻片 | |
生物惰性表面厚度 | 200納米 |
生物惰性表面材料 | 多元醇基水凝膠 |
蛋白質(zhì)涂層 | 不可能 |
生物惰性表面技術(shù)背后的原理
沒有細(xì)胞附著
生物惰性表面是與ibidi Polymer Coverslip#1.5共價(jià)結(jié)合的薄的多元醇水凝膠層。與標(biāo)準(zhǔn)的超低附著力(ULA)涂層相反,Bioinert*不粘附,即使在長期實(shí)驗(yàn)中也不允許任何生物分子的結(jié)合。因此,Bioinert技術(shù)在基于細(xì)胞的測(cè)定中提供了幾天甚至幾周的穩(wěn)定鈍化。
沒有細(xì)胞-底物相互作用
Bioinert創(chuàng)造了一種環(huán)境,在該環(huán)境中,細(xì)胞與細(xì)胞之間的相互作用比細(xì)胞與底物之間的相互作用更為重要。實(shí)際上,后者被*阻止了。Bioinert表面的穩(wěn)定性允許在同一盤上進(jìn)行數(shù)天甚至數(shù)周的長期實(shí)驗(yàn),而不會(huì)粘附任何蛋白質(zhì)。即使您的細(xì)胞需要胎牛血清濃度高的培養(yǎng)基,Bioinert也會(huì)阻止任何細(xì)胞或蛋白質(zhì)粘附到表面。
沒有事先準(zhǔn)備
生物惰性表面隨時(shí)可用。無需任何預(yù)水合步驟。一旦被緩沖液或細(xì)胞培養(yǎng)基浸濕,表面將自行膨脹。
無自發(fā)熒光
ibidi Polymer Coverslip的扁平,薄底材料和出色的光學(xué)質(zhì)量均可以實(shí)現(xiàn)高分辨率顯微鏡,而不會(huì)產(chǎn)生破壞性的自發(fā)熒光。
ibiTreat,未涂覆和生物惰性的表面比較
ibiTreat
優(yōu)異的細(xì)胞粘附力
- 貼壁細(xì)胞培養(yǎng)
- 可能有ECM涂層
親水的ibiTreat表面即使在沒有明確的蛋白質(zhì)涂層的情況下也能提供出色的細(xì)胞粘附性。但是,ECM蛋白包衣可以在ibiTreat上完成,沒有任何限制。ibiTreat表面非常適合培養(yǎng)不需要任何特殊涂層的貼壁細(xì)胞。
無涂層
弱細(xì)胞粘附
- 貼壁細(xì)胞培養(yǎng)
- 可能有ECM涂層
疏水的未涂層表面如果以前未使用ECM蛋白涂層,則細(xì)胞粘附力較弱。ECM蛋白包衣可以在未包被的表面上進(jìn)行,沒有任何限制。未經(jīng)涂層的表面非常適合培養(yǎng)需要特定涂層的貼壁細(xì)胞。
生物惰性
無細(xì)胞粘附
- 懸浮細(xì)胞,細(xì)胞聚集體,球體,胚狀體(EB),類器官的培養(yǎng)
- 無法使用ECM涂層
親水性生物惰性表面會(huì)阻礙任何蛋白質(zhì)附著,從而抑制后續(xù)的細(xì)胞附著。與ibiTreat和未涂層表面不同,不可能進(jìn)行涂層。生物惰性表面非常適合培養(yǎng)懸浮細(xì)胞和細(xì)胞聚集體。
應(yīng)用示例:使用生物惰性表面的球狀培養(yǎng)和3D投影
使用基于瓊脂糖的液體覆蓋技術(shù)從HT-1080 LifeAct細(xì)胞系中生成球狀體,然后將其轉(zhuǎn)移到35毫米高生物惰性的μ-Dish 顯微鏡中。
HT-1080 LifeAct橢球體的共聚焦激光掃描圖像。該圖像是一系列共焦部分的投影。彩虹色標(biāo)度表示與蓋玻片表面的距離。暖色=靠近表面,冷色=遠(yuǎn)離表面。
應(yīng)用示例:使用生物惰性表面的球狀培養(yǎng)和FDA / PI染色
Bioinert表面非常適合球體和類器官的短期和長期3D培養(yǎng)。由于特異性和非特異性細(xì)胞的固定均被抑制,因此細(xì)胞被迫進(jìn)入懸浮狀態(tài)??,從而能夠形成大小球體。為了評(píng)估生存力,使用標(biāo)記活細(xì)胞的雙乙酸熒光素(FDA)和染色死細(xì)胞的碘化丙啶(PI)對(duì)細(xì)胞染色。
有關(guān)FDA / PI染色的更多詳細(xì)信息,請(qǐng)參閱我們的應(yīng)用筆記33,使用FDA和PI進(jìn)行活/死染色(PDF)。
HepG2橢球體的共聚焦激光掃描部分。HepG2細(xì)胞的球狀體是用基于瓊脂糖的液體覆蓋技術(shù)生成的,然后轉(zhuǎn)移到35毫米高生物活性的µ-Dish中。FDA(綠色)表示在球形外層的活細(xì)胞。PI(紅色)標(biāo)記壞死球體中心內(nèi)的死細(xì)胞。比例尺為200 µm。
通過液體覆蓋法生成不同細(xì)胞系的球狀體,并將其轉(zhuǎn)移到35毫米的高密度碟中,用于FDA / PI染色和活細(xì)胞成像。
HepG2球體
HT1080橢球
HUVEC橢球
MCF7球體
如圖所示,F(xiàn)DA / PI染色的活細(xì)胞寬視野熒光成像可區(qū)分不同的細(xì)胞類型。FDA(綠色)表示在球形外層的活細(xì)胞。PI(紅色)標(biāo)記壞死球體中心內(nèi)的死細(xì)胞。注意不同的球體形態(tài),這取決于細(xì)胞類型。
FDA-PI染色的MCF-7細(xì)胞球的正視圖和側(cè)視圖。共聚焦激光掃描圖像是從FDA信號(hào)的連續(xù)共聚焦部分的覆蓋圖投影而來的。比例尺為100 µm。
應(yīng)用實(shí)例:培養(yǎng)不同表面的貼壁細(xì)胞
μ-盤35mm時(shí),高生物惰性適用于各種貼壁細(xì)胞類型的培養(yǎng)(參見下圖)。
在ibiTreat表面上,所有貼壁細(xì)胞類型都顯示出很強(qiáng)的細(xì)胞貼壁性。由于只有血清蛋白涂層,因此在未涂層的表面上觀察到較弱的細(xì)胞粘附。在生物惰性表面上,細(xì)胞根本不附著,在大多數(shù)細(xì)胞類型中都可以觀察到球體形成。取決于特定細(xì)胞類型的細(xì)胞-細(xì)胞粘附,球體或多或少均勻地形成。
將不同類型的貼壁細(xì)胞分別接種在ibiTreat,未包被和Bioinert表面上。在沒有事先ECM蛋白包被的*生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞。播種后24小時(shí)拍攝圖像。相差顯微鏡,比例尺為300 µm。
注:楊清辰發(fā)布