LifeAct-TagGFP2蛋白

LifeAct-TagGFP2蛋白
用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞中F-肌動(dòng)蛋白快速染色和立即分析的重組蛋白
F-肌動(dòng)蛋白的出色可視化， 用于研究細(xì)胞骨架組織和細(xì)胞動(dòng)力學(xué)
活細(xì)胞中F-肌動(dòng)蛋白的染色-在數(shù)分鐘內(nèi)即可獲得結(jié)果
鬼筆環(huán)肽的無(wú)毒替代品，用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色
對(duì)細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)的潛在干擾小

LifeAct-TagGFP2蛋白

LifeAct-TagGFP2蛋白

應(yīng)用領(lǐng)域

• 細(xì)胞骨架組織
  • 無(wú)毒肌動(dòng)蛋白可視化
  • 熒光染色
• 細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)
  • 細(xì)胞過程中的肌動(dòng)蛋白動(dòng)力學(xué)
  • 活細(xì)胞成像和顯微鏡

技術(shù)指標(biāo)

形成	凍干
存儲(chǔ)	-80°攝氏度
TagGFP2（Ex max / Em max）	483/506納米

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請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)肌動(dòng)蛋白可視化的更多詳細(xì)信息。

在此處下載完整的“ Actin可視化”應(yīng)用指南，以PDF格式。

技術(shù)特點(diǎn)

• 重組蛋白，凍干
• C端His標(biāo)簽
• 建立活細(xì)胞和固定細(xì)胞中F-肌動(dòng)蛋白染色的規(guī)程
• 出色的信噪比
• 具有出色生物相容性的活體樣品的無(wú)毒F-肌動(dòng)蛋白染色

LifeAct是一種17個(gè)氨基酸的肽，來源于釀酒酵母蛋白。LifeAct可以染色活的或固定的真核細(xì)胞中的絲狀肌動(dòng)蛋白（F-actin）結(jié)構(gòu)。

請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)LifeAct的詳細(xì)信息。

使用LifeAct-TagGFP2蛋白在活細(xì)胞中可視化F-肌動(dòng)蛋白

LifeAct-TagGFP2蛋白非常適合快速有效地可視化活細(xì)胞中的細(xì)胞骨架。對(duì)于染色過程，您可以使用任何適用于您感興趣的細(xì)胞的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移方法。

注意：請(qǐng)記住，與mRNA或DNA轉(zhuǎn)染相比，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的實(shí)際含量通常較低。為了充分可視化細(xì)胞內(nèi)F-肌動(dòng)蛋白，您應(yīng)該使用高質(zhì)量的顯微鏡設(shè)備。

LifeAct-TagGFP2蛋白轉(zhuǎn)移后，Rat1成纖維細(xì)胞中F-肌動(dòng)蛋白的活細(xì)胞成像（30 µg / ml，3分鐘）。

肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的超分辨顯微鏡（STED）

使用LifeAct-TagGFP2蛋白，可以詳細(xì)顯示肌動(dòng)蛋白的細(xì)胞骨架。在該實(shí)驗(yàn)中，將固定的Rat1成纖維細(xì)胞與LifeAct-TagGFP2蛋白在µ-Slide VI 0.4 ibiTreat中孵育。進(jìn)行了模擬發(fā)射損耗（STED）顯微鏡檢查，以創(chuàng)建超分辨率圖像。

使用LifeAct-TagGFP2蛋白對(duì)Rat1成纖維細(xì)胞中肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的超分辨率顯微鏡檢查。顯微鏡是在STEDYCON超分辨率STED納米顯微鏡系統(tǒng)（德國(guó)哥廷根Abberior Instruments GmbH）上使用Plan-Neofluar 100x / 1.4物鏡進(jìn)行的。

使用LifeAct-TagGFP2蛋白在固定細(xì)胞中觀察F-肌動(dòng)蛋白

除了在活細(xì)胞中工作外，LifeAct-TagGFP2蛋白還是一種快速簡(jiǎn)便的解決方案，可在多種固定細(xì)胞中進(jìn)行高效F-肌動(dòng)蛋白染色。

注意：在固定過程中，甲醇和丙酮會(huì)破壞肌動(dòng)蛋白。因此，建議避免與LifeAct-TagGFP2蛋白結(jié)合使用任何含甲醇或丙酮的固定劑。

CHO-K1

HT1080

MCF7

大鼠1

用Triton X-100滲透福爾馬林固定的細(xì)胞，并在LifeAct-TagGFP2蛋白溶液（PBS中10 µg / ml）中孵育1小時(shí)。

方法比較：使用LifeAct在活細(xì)胞中可視化F-Actin

	LifeAct-Plasmid	LifeAct-mRNA  和Fuse-It-mRNA	LifeAct蛋白  與Fuse-It-P	LifeAct-  腺病毒	LifeAct-  慢病毒
方法適用于1
細(xì)胞系	+++	+++	+++	+++	+++
原代細(xì)胞	+	+++	++	+++	+++
非哺乳動(dòng)物細(xì)胞	--	+	+	--	--
轉(zhuǎn)染穩(wěn)定性
短暫的	是	是	是	是	沒有
穩(wěn)定	是	沒有	沒有	沒有	是
協(xié)議與分析
協(xié)議簡(jiǎn)單	+++	++	++	+++	+++
LifeAct讀出開始	1-2天	幾個(gè)小時(shí)	幾分鐘	1-2天	1-2天
LIFEACT讀出持續(xù)時(shí)間	幾天 （如果穩(wěn)定，則無(wú)限遠(yuǎn)）	幾天	多1天	幾天	幾天 （如果穩(wěn)定，則無(wú)限遠(yuǎn)）
信號(hào)強(qiáng)度	+++	+++	+	+++	+++
額外好處
防止過度表達(dá)的 假象	--	+	+++	+	+
預(yù)防病毒反應(yīng)	+++	+++	+++	--	--
轉(zhuǎn)移 方法的生物相容性	+	+++	+++	++	++
肌動(dòng)蛋白功能	+++	+++	+++	+++	+++
安全考慮
生物安全等級(jí)	BSL1	--	--	BSL2	BSL2

1并非所有這些組合都已在所有指示的細(xì)胞類型中進(jìn)行了測(cè)試。我們鼓勵(lì)您使用此表作為指導(dǎo)，以了解如何地使用LifeAct系統(tǒng)。

 

注：楊清辰發(fā)布