rLV-Ubi-LifeAct慢病毒載體 現(xiàn)貨

rLV-Ubi-LifeAct慢病毒載體 現(xiàn)貨
肌動(dòng)蛋白標(biāo)記物，用于在慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)后可視化活細(xì)胞中的F-肌動(dòng)蛋白。特別適用于穩(wěn)定細(xì)胞系的產(chǎn)生。
絢麗的可視化F-肌動(dòng)蛋白在活細(xì)胞成像 -細(xì)胞骨架的組織和細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的成像
對(duì) 細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)的潛在干擾小
出色的信噪比
容易產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系
對(duì)分裂和非分裂細(xì)胞有效
慢病毒載體，可以使用
Ubi（泛素）啟動(dòng)子

rLV-Ubi-LifeAct慢病毒載體 現(xiàn)貨

rLV-Ubi-LifeAct慢病毒載體 現(xiàn)貨

應(yīng)用領(lǐng)域

• 細(xì)胞骨架組織：
  -無(wú)毒肌動(dòng)蛋白可視化
  -熒光染色
• 細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)：
  -細(xì)胞過(guò)程中的肌動(dòng)蛋白動(dòng)力學(xué)
  - 活細(xì)胞成像和顯微鏡檢查

技術(shù)特點(diǎn)

• *的生物相容性-活體樣品的無(wú)毒染色
• 容易產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系
• 用于體外和體內(nèi)應(yīng)用

技術(shù)指標(biāo)

濃度	1 x 10 7 TU /毫升
存儲(chǔ)	-80°攝氏度
TagGFP2（Ex max / Em max）	483/506納米
TagRFP（Ex max / Em max）	555/584納米

 

注意：
請(qǐng)注意，您將使用包含傳染性病毒的產(chǎn)品。對(duì)于所有含有BSL-2生物的材料，遵循推薦的NIH指南。

了解更多

請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)肌動(dòng)蛋白可視化的更多詳細(xì)信息。

在此處下載完整的“ Actin可視化”應(yīng)用指南，以PDF格式。

 

LifeAct是一種17個(gè)氨基酸的肽，來(lái)源于釀酒酵母的一種蛋白質(zhì)。LifeAct對(duì)活的或固定的真核細(xì)胞和組織中的絲狀肌動(dòng)蛋白（F-actin）結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色。

請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)LifeAct的詳細(xì)信息。

源自人類免疫缺陷病毒（HIV-1）的慢病毒載體已成為將基因傳遞至哺乳動(dòng)物細(xì)胞的主要工具。慢病毒載體的利特征是能夠在體外和體內(nèi)介導(dǎo)有效的轉(zhuǎn)導(dǎo)，整合和長(zhǎng)期表達(dá)進(jìn)入分裂和非分裂細(xì)胞的能力。

具有水泡性口炎病毒包膜G（VSV-G）蛋白的假型包膜擴(kuò)大了靶細(xì)胞范圍。慢病毒載體現(xiàn)已顯示可將基因傳遞至神經(jīng)元，淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。先前的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體無(wú)法用于這些細(xì)胞類型。此外，慢病毒載體已被證明可有效地體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)腦，肝，肌肉和視網(wǎng)膜，而無(wú)任何毒性作用或免疫反應(yīng)。

所提供的慢病毒是VSV-G假型泛嗜性病毒，它既可以感染分裂細(xì)胞也可以感染非分裂細(xì)胞，同時(shí)能夠穩(wěn)定整合到細(xì)胞基因組中。

用rLV-LifeAct轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞后，使用熒光標(biāo)記TagGFP2或TagRFP **可視化F-肌動(dòng)蛋白。使用這種方法，即使在難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型（例如原代細(xì)胞（例如神經(jīng)元細(xì)胞））中，也可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)100％的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。該病毒可用于產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系，并可通過(guò)熒光分選選擇穩(wěn)定的克隆。

當(dāng)需要瞬時(shí)或穩(wěn)定表達(dá)LifeAct時(shí)，LifeAct質(zhì)粒可用于許多細(xì)胞類型。在這種情況下，研究人員可以在兩種不同的啟動(dòng)子之間進(jìn)行選擇：CMV（巨細(xì)胞病毒）或CAG（修飾的雞β-肌動(dòng)蛋白）。

腺病毒載體可用于難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，或需要高達(dá)100％轉(zhuǎn)基因表達(dá)的細(xì)胞。在這種情況下，也可以在前面提到的兩個(gè)啟動(dòng)子之間進(jìn)行選擇。這些載體適用于僅需要LifeAct-TagGFP2或LifeAct-TagRFP瞬時(shí)表達(dá)的應(yīng)用。

方法比較：使用LifeAct在活細(xì)胞中可視化F-Actin

	LifeAct-Plasmid	LifeAct-mRNA  和Fuse-It-mRNA	LifeAct蛋白  與Fuse-It-P	LifeAct-  腺病毒	LifeAct-  慢病毒
方法適用于1
細(xì)胞系	+++	+++	+++	+++	+++
原代細(xì)胞	+	+++	++	+++	+++
非哺乳動(dòng)物細(xì)胞	--	+	+	--	--
轉(zhuǎn)染穩(wěn)定性
短暫的	是	是	是	是	沒(méi)有
穩(wěn)定	是	沒(méi)有	沒(méi)有	沒(méi)有	是
協(xié)議與分析
協(xié)議簡(jiǎn)單	+++	++	++	+++	+++
LifeAct讀出開(kāi)始	1-2天	幾個(gè)小時(shí)	幾分鐘	1-2天	1-2天
LIFEACT讀出持續(xù)時(shí)間	幾天 （如果穩(wěn)定，則無(wú)限遠(yuǎn)）	幾天	多1天	幾天	幾天 （如果穩(wěn)定，則無(wú)限遠(yuǎn)）
信號(hào)強(qiáng)度	+++	+++	+	+++	+++
額外好處
防止過(guò)度表達(dá)的 假象	--	+	+++	+	+
預(yù)防病毒反應(yīng)	+++	+++	+++	--	--
轉(zhuǎn)移 方法的生物相容性	+	+++	+++	++	++
肌動(dòng)蛋白功能	+++	+++	+++	+++	+++
安全考慮
生物安全等級(jí)	BSL1	--	--	BSL2	BSL2

1并非所有這些組合都已在所有指示的細(xì)胞類型中進(jìn)行了測(cè)試。我們鼓勵(lì)您使用此表作為指導(dǎo)，以了解如何地使用LifeAct系統(tǒng)。

 注：楊清辰發(fā)布