HT-1080 LifeAct穩(wěn)定細(xì)胞系

HT-1080 LifeAct穩(wěn)定細(xì)胞系
表達(dá)人纖維肉瘤的穩(wěn)定LifeAct-TagGFP2細(xì)胞系
長(zhǎng)期F-肌動(dòng)蛋白可視化-保證25個(gè)通道
事實(shí)證明與親代HT-1080細(xì)胞系相同
LifeAct確保對(duì)細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)的潛在干擾小

HT-1080 LifeAct穩(wěn)定細(xì)胞系

HT-1080 LifeAct穩(wěn)定細(xì)胞系

應(yīng)用領(lǐng)域

• 活細(xì)胞成像的細(xì)胞骨架組織和動(dòng)力學(xué)
• 基于細(xì)胞的功能性測(cè)定，例如趨化性和遷移
• 在實(shí)驗(yàn)中可用作特征對(duì)照

為了創(chuàng)建穩(wěn)定的LifeAct-TagGFP2表達(dá)細(xì)胞系，用編碼TagGFP2標(biāo)記的LifeAct的質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染人纖維肉瘤細(xì)胞。

請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)LifeAct的詳細(xì)信息。

HT-1080 LifeAct-TagGFP2細(xì)胞具有高度動(dòng)態(tài)的絲狀肌動(dòng)蛋白。通過(guò)穩(wěn)定的LifeAct表達(dá)，可以實(shí)現(xiàn)具有極低背景熒光的絲狀肌動(dòng)蛋白的可視化。此外，對(duì)細(xì)胞的*表征表明它們顯示出與野生型（wt）細(xì)胞相同的行為。

由于細(xì)胞系的快速生長(zhǎng)和接觸抑制的缺乏，它構(gòu)成了理想的腫瘤模型。這些特征與明亮且特異的F-肌動(dòng)蛋白染色相結(jié)合，形成了一種功能強(qiáng)大的工具，可廣泛應(yīng)用于活細(xì)胞成像和高內(nèi)涵方法。

技術(shù)特點(diǎn)

• 同類細(xì)胞池
• 保證細(xì)胞系身份
• 純度測(cè)試
• 顯微鏡檢測(cè)的轉(zhuǎn)基因表達(dá)

技術(shù)指標(biāo)

細(xì)胞/小瓶	5 x 10 5
介質(zhì)	ibidi冷凍培養(yǎng)基
存儲(chǔ)	液氮
生物安全等級(jí)	1個(gè)
不育性	測(cè)試酵母和細(xì)菌， 包括支原體
發(fā)起人	CAG（修飾的雞β-肌動(dòng)蛋白）
轉(zhuǎn)基因	LifeAct-TagGFP2 *

 

 

產(chǎn)地信息

生物	智人（人類）
資源	結(jié)締組織?。豪w維肉瘤
年齡	35歲
性別	男
種族	高加索人
生長(zhǎng)特性	附著的
形態(tài)學(xué)	上皮的

了解更多

請(qǐng)?jiān)诖颂幷业接嘘P(guān)肌動(dòng)蛋白可視化的更多詳細(xì)信息。

在此處下載完整的“ Actin可視化”應(yīng)用指南，以PDF格式。

HT-1080 LifeAct-TagGFP2的基本表征

基因組表征：

通過(guò)短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）分析對(duì)人類細(xì)胞系進(jìn)行基因組認(rèn)證，已廣泛用于確保細(xì)胞系的同一性和研究細(xì)胞系的純度。
人類基因組中的短串聯(lián)重復(fù)多態(tài)性用于區(qū)分個(gè)體。通過(guò)鑒定基因組中典型位置的特定序列的短重復(fù)序列，有可能創(chuàng)建單個(gè)人類（如法醫(yī)所用）或細(xì)胞系的遺傳圖譜。

使用上述方法分析了ibidi的HT-1080 LifeAct-TagGFP2細(xì)胞。該分析是由DSBZ（一家經(jīng)過(guò)ISO認(rèn)證的萊布尼茲研究所）進(jìn)行的。分析顯示，HT-1080 LifeAct-TagGFP2細(xì)胞與HT-1080野生型細(xì)胞相同。

細(xì)胞增殖分析：

使用與培養(yǎng)起點(diǎn)相同的定義條件，將HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細(xì)胞培養(yǎng)8天，然后每天分析細(xì)胞數(shù)。

該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，兩種細(xì)胞系在預(yù)定的時(shí)間內(nèi)均以相同的速率生長(zhǎng)。使用統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)證實(shí)了該結(jié)果。

細(xì)胞群體的熒光強(qiáng)度：

使用流式細(xì)胞儀分析了HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細(xì)胞的熒光強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。

與野生型細(xì)胞相比，至少95％的細(xì)胞具有熒光，平均熒光強(qiáng)度有兩個(gè)對(duì)數(shù)偏移。

HT-1080 LifeAct-TagGFP2的功能表征

趨化性2D和3D

HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細(xì)胞的化學(xué)趨化分析在µ-Slide化學(xué)趨化分析中進(jìn)行了分析，使用胎牛血清（FCS）作為化學(xué)引誘劑（更多詳細(xì)信息，請(qǐng)參見應(yīng)用筆記17）。

這些測(cè)定的結(jié)果表明，HT-1080 LifeAct-TagGFP2細(xì)胞以與野生型細(xì)胞相同的速度和正向遷移指數(shù)（FMI）遷移。這些結(jié)果使用學(xué)生t檢驗(yàn)進(jìn)行了確認(rèn)。p <0.05被認(rèn)為是顯著的。

傷口愈合：

將HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細(xì)胞接種在與Culture-Insert結(jié)合的µ-Slide 8 孔中。經(jīng)過(guò)24小時(shí)的視頻顯微鏡檢查后，使用WimScratch自動(dòng)化軟件解決方案分析了傷口閉合情況。

HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細(xì)胞顯示出相當(dāng)?shù)募?xì)胞前沿速度。這些結(jié)果使用學(xué)生t檢驗(yàn)進(jìn)行了確認(rèn)。p <0.05被認(rèn)為是顯著的。

注：楊清辰發(fā)布