詳細介紹
HT-1080 LifeAct穩(wěn)定細胞系
HT-1080 LifeAct穩(wěn)定細胞系
應(yīng)用領(lǐng)域
- 活細胞成像的細胞骨架組織和動力學(xué)
- 基于細胞的功能性測定,例如趨化性和遷移
- 在實驗中可用作特征對照
為了創(chuàng)建穩(wěn)定的LifeAct-TagGFP2表達細胞系,用編碼TagGFP2標記的LifeAct的質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染人纖維肉瘤細胞。
請在此處找到有關(guān)LifeAct的詳細信息。
HT-1080 LifeAct-TagGFP2細胞具有高度動態(tài)的絲狀肌動蛋白。通過穩(wěn)定的LifeAct表達,可以實現(xiàn)具有極低背景熒光的絲狀肌動蛋白的可視化。此外,對細胞的*表征表明它們顯示出與野生型(wt)細胞相同的行為。
由于細胞系的快速生長和接觸抑制的缺乏,它構(gòu)成了理想的腫瘤模型。這些特征與明亮且特異的F-肌動蛋白染色相結(jié)合,形成了一種功能強大的工具,可廣泛應(yīng)用于活細胞成像和高內(nèi)涵方法。
技術(shù)特點
- 同類細胞池
- 保證細胞系身份
- 純度測試
- 顯微鏡檢測的轉(zhuǎn)基因表達
技術(shù)指標
細胞/小瓶 | 5 x 10 5 |
介質(zhì) | ibidi冷凍培養(yǎng)基 |
存儲 | 液氮 |
生物安全等級 | 1個 |
不育性 | 測試酵母和細菌, 包括支原體 |
發(fā)起人 | CAG(修飾的雞β-肌動蛋白) |
轉(zhuǎn)基因 | LifeAct-TagGFP2 * |
產(chǎn)地信息
生物 | 智人(人類) |
資源 | 結(jié)締組織病:纖維肉瘤 |
年齡 | 35歲 |
性別 | 男 |
種族 | 高加索人 |
生長特性 | 附著的 |
形態(tài)學(xué) | 上皮的 |
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請在此處找到有關(guān)肌動蛋白可視化的更多詳細信息。
在此處下載完整的“ Actin可視化”應(yīng)用指南,以PDF格式。
HT-1080 LifeAct-TagGFP2的基本表征
基因組表征:
通過短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)分析對人類細胞系進行基因組認證,已廣泛用于確保細胞系的同一性和研究細胞系的純度。
人類基因組中的短串聯(lián)重復(fù)多態(tài)性用于區(qū)分個體。通過鑒定基因組中典型位置的特定序列的短重復(fù)序列,有可能創(chuàng)建單個人類(如法醫(yī)所用)或細胞系的遺傳圖譜。
使用上述方法分析了ibidi的HT-1080 LifeAct-TagGFP2細胞。該分析是由DSBZ(一家經(jīng)過ISO認證的萊布尼茲研究所)進行的。分析顯示,HT-1080 LifeAct-TagGFP2細胞與HT-1080野生型細胞相同。
細胞增殖分析:
使用與培養(yǎng)起點相同的定義條件,將HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細胞培養(yǎng)8天,然后每天分析細胞數(shù)。
該實驗的結(jié)果表明,兩種細胞系在預(yù)定的時間內(nèi)均以相同的速率生長。使用統(tǒng)計檢驗證實了該結(jié)果。
細胞群體的熒光強度:
使用流式細胞儀分析了HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細胞的熒光強度和陽性細胞數(shù)。
與野生型細胞相比,至少95%的細胞具有熒光,平均熒光強度有兩個對數(shù)偏移。
HT-1080 LifeAct-TagGFP2的功能表征
趨化性2D和3D
HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細胞的化學(xué)趨化分析在µ-Slide化學(xué)趨化分析中進行了分析,使用胎牛血清(FCS)作為化學(xué)引誘劑(更多詳細信息,請參見應(yīng)用筆記17)。
這些測定的結(jié)果表明,HT-1080 LifeAct-TagGFP2細胞以與野生型細胞相同的速度和正向遷移指數(shù)(FMI)遷移。這些結(jié)果使用學(xué)生t檢驗進行了確認。p <0.05被認為是顯著的。
傷口愈合:
將HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細胞接種在與Culture-Insert結(jié)合的µ-Slide 8 孔中。經(jīng)過24小時的視頻顯微鏡檢查后,使用WimScratch自動化軟件解決方案分析了傷口閉合情況。
HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細胞顯示出相當(dāng)?shù)募毎把厮俣?。這些結(jié)果使用學(xué)生t檢驗進行了確認。p <0.05被認為是顯著的。
注:楊清辰發(fā)布