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肝缺血(HI)小鼠模型
動物品系:SPF級Balb/C小鼠,雄性,周齡為8w-10w,體重為30g-35g
實驗分六組:空白對照組、模型組、陽性藥物組、受試藥物低、中、高劑量組
實驗周期:4-6w
造模方法:缺血再灌注
1. 小鼠術(shù)前12 h禁食,自由飲水。
2. 3%戊吧比妥鈉80mg/kg腹腔注射麻醉,麻醉成功后將小鼠平躺在手術(shù)臺上膠帶固定四肢,將小鼠腹部術(shù)去毛,用碘酒和75%乙醇術(shù)區(qū)消毒。
3. 取腹正中切口1cm,打開腹腔,小心分離出肝臟供血的門靜脈和肝動脈。
4. 用無創(chuàng)血管夾夾閉門靜脈和肝動脈,0.5min后,肉眼可見阻斷葉明顯變白,說明阻斷成功,用止血鉗夾閉皮膚切口臨時關(guān)閉腹腔,同時將小鼠放在37℃恒溫加熱墊上保溫。
5. 完成持續(xù)缺血60min后,重新打開腹腔,迅速取出血管夾,恢復(fù)缺血肝血流,0.5min左右可見缺血區(qū)肝臟由白色逐漸恢復(fù)為鮮紅色表明再灌注成功,逐層縫合腹腔肌肉和皮膚關(guān)閉腹腔,完成手術(shù)。待小鼠清醒后放回飼養(yǎng)室飼養(yǎng),密切關(guān)注小鼠的狀態(tài)及生存狀況并做好記錄。
注意事項
1.分離肝門時用棉簽分離,可避免對肝臟的損傷
2.術(shù)前禁食有利于手術(shù)進行
3.阻斷血流要一次成功,否則會造成缺血預(yù)處理,減輕損傷程度
4.取材時鑷子不要損傷肝臟
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