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免疫熒光實驗
一、實驗介紹
免疫熒光(IF),是應用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過熒光標記抗體對組織細胞內(nèi)抗原進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(shù)。
二、特點及適用范圍
組織學、胚胎學、生物學、病理學教學與科研。
三、石蠟切片免疫熒光單標實驗步驟
石蠟切片
固定——包埋——切片——免疫熒光——拍照——結(jié)果分析
冰凍切片(無包埋費)
凍存(-80℃)——切片——免疫熒光——拍照——結(jié)果分析
免疫熒光的片子除了可以用熒光顯微鏡拍照,還可以用激光共聚焦顯微鏡拍照,得到分辨率更高的圖片;激光共聚焦一般用于亞細胞結(jié)構(gòu)的觀察,如自噬小體、細胞間納米管道等。
四、實驗結(jié)果展示
五、送樣運輸要求:
樣本放置于5倍樣本體積的4%多聚甲醛固定液中固定24h以上,常溫運輸送樣。切勿固定時間過長,切勿冷凍結(jié)冰。
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