通過比較糖和纖維素酶及其混合物的紅外（IR）譜圖，判斷海藻糖、葡萄糖和蔗糖原有氫鍵的作用形式發(fā)生了改變，纖維素酶和糖分子之間形成了氫鍵。而纖維素酶對葡聚糖的紅外光譜特征頻率幾乎沒有影響，說明酶和葡聚糖分子之間沒有明顯的相互作用。此外，紅外譜圖還表明，海藻糖、葡萄糖和蔗糖的羥基與纖維素酶分子的酰胺基之間存在比較強(qiáng)的分子間作用力。

根據(jù)差示掃描量熱譜圖結(jié)果，測得海藻糖玻璃化轉(zhuǎn)變溫度為107℃，相轉(zhuǎn)變溫度為123℃，葡聚糖玻璃化轉(zhuǎn)變溫度為92℃，相轉(zhuǎn)變溫度為132℃。葡萄糖和蔗糖沒有玻璃化轉(zhuǎn)變現(xiàn)象。說明海藻糖和葡聚糖都存在玻璃化轉(zhuǎn)變溫度且溫度較高，其在比較高的溫度下仍可處于玻璃態(tài)。

圖1 海藻糖、葡聚糖、葡萄糖和蔗糖的差示掃描量熱譜圖

差示掃描量熱譜圖顯示，纖維素酶的物理熱變性溫度為120℃，在添加海藻糖之后，物理熱變性溫度提高到137℃，添加葡萄糖后該物理熱變性溫度提高到140℃，說明海藻糖和葡萄糖同纖維素酶的分子之間存在較強(qiáng)的分子間作用力，且該作用力增加了酶分子空間結(jié)構(gòu)的熱穩(wěn)定性。

圖2 纖維素酶與糖混合物的差示掃描量熱譜圖

綜合以上結(jié)果，葡萄糖和蔗糖在高溫下，其羥基可以替代水分子同纖維素酶分子表面的酰胺基形成氫鍵，但實(shí)驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)，高溫下葡萄糖和蔗糖與酶的混合物發(fā)生明顯的褐變現(xiàn)象，說明有化學(xué)反應(yīng)發(fā)生，差示掃描也說明葡萄糖和蔗糖在高溫下不能形成玻璃態(tài)，因此高溫下葡萄糖與蔗糖無法保護(hù)纖維素酶的酶活性。

葡聚糖的羥基不能與纖維素酶分子形成氫鍵，但在高溫下能形成玻璃態(tài)對酶分子進(jìn)行保護(hù)。

海藻糖的羥基與纖維素酶的酰胺基以氫鍵形式結(jié)合，提高了酶的熱變性溫度。海藻糖分子包裹在酶分子周圍或填充在酶蛋白分子空間結(jié)構(gòu)內(nèi)，特別是酶活性部位附近，并在酶分子內(nèi)外部形成玻璃態(tài)，將酶蛋白的空間結(jié)構(gòu)固定住，從而保護(hù)酶活性。相比之下，海藻糖在上述四種糖類中能夠?yàn)槔w維素蛋白酶提供很強(qiáng)的保護(hù)作用。

艾偉拓（AVT）海藻糖產(chǎn)品介紹

艾偉拓（AVT）注射級海藻糖產(chǎn)品，超低內(nèi)毒素（<0.1IU/g）,符合各國藥典標(biāo)準(zhǔn)，支持中美雙報(bào)，已同中國各大生物制藥藥企穩(wěn)定合作；本地化生產(chǎn)供應(yīng)，產(chǎn)能充足，噸級現(xiàn)貨供應(yīng)，適用于化藥、生物制品、疫苗等各類制劑生產(chǎn)需求。

海藻糖（供注射用）（無菌）

1、產(chǎn)品名：海藻糖（供注射用）（無菌）

2、中文名稱：D(+)-海藻糖二水合物

3、英文名稱：D(+)-Trehalose dihydrate (for injection)

4、化學(xué)名稱：α-D-吡喃葡萄糖基-α-D-吡喃葡糖苷二水合物

5、型號：Hipo-S

6、含量測定：99.3%

7、CAS號：6138-23-4

8、EINECS登錄號：202-739-6

9、備案登記號：F20190000452

10、DMF號：034401

11、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：符合各國藥典標(biāo)準(zhǔn)（Chp,USP,JP,EP）

12、分子式：C12H22O11·2H2O

13、分子量：378.33

14、性狀：白色結(jié)晶性粉末

15、貨號：008001

海藻糖（供注射用）

1、產(chǎn)品名：海藻糖（供注射用）

2、中文名稱：D(+)-海藻糖二水合物

3、化學(xué)名稱：α-D-吡喃葡萄糖基-α-D-吡喃葡糖苷二水合物

4、英文名稱：D(+)-Trehalose dihydrate (for injection)

5、型號：Hipo-I

6、含量測定：99.3%

7、CAS號：6138-23-4

8、備案登記號：F20200000284

9、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：符合各國藥典標(biāo)準(zhǔn)（Chp,USP,JP,EP）

10、分子式：C12H22O11·2H2O

11、分子量：378.33

12、性狀：白色結(jié)晶性粉末

13、貨號：008002

海藻糖對蛋白的保護(hù)機(jī)理——通過不同糖對纖維素酶保護(hù)的機(jī)理研究分析

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