1. 皮革水解蛋白含量檢測(cè)使用說(shuō)明書(shū)

【簡(jiǎn)介】

皮革粉就是將生產(chǎn)皮衣、皮箱、皮鞋、皮沙發(fā)、皮包等皮具時(shí)剩下的邊角料，經(jīng)過(guò)化學(xué)處理后，水解出蛋白，再加一些香精、色素等原料而制得的皮革水解產(chǎn)物，由于動(dòng)物的皮毛成分是蛋白質(zhì)，因此皮革水解產(chǎn)物被稱為皮革水解蛋白。這種產(chǎn)品含有危害人體健康的重金屬六價(jià)鉻，不能用于食品加工。通過(guò)皮革水解提取氨基酸肽和氨基酸液，它是一種致癌物。不法分子將其添加到食品中的目的主要是提高蛋白質(zhì)含量，通常將其摻入到生鮮乳中增加生鮮乳蛋白質(zhì)的含量，但會(huì)改變生鮮乳的口感及氨基酸的組成，降低生鮮乳中氨基酸的吸收利用率，尤其“鞣革”下角廢料中含有的重金屬鉻，如果被人體吸收蓄積，可導(dǎo)致關(guān)節(jié)疏松、關(guān)節(jié)腫大、造成人體重金屬中毒。

皮革水解蛋白非法添加的主要對(duì)象為乳與乳制品、含乳飲料。它與三聚氰胺不同，三聚氰胺俗稱“蛋白精”，但并非真正的蛋白質(zhì)，而皮革水解物是真正的蛋白質(zhì)，若添加到食品當(dāng)中，檢測(cè)起來(lái)難度更大。由于L-經(jīng)脯氨酸是動(dòng)物皮骨的膠原蛋白構(gòu)成的特征氨基酸，通過(guò)水解可以將乳蛋白和其他動(dòng)物皮骨的膠原蛋白區(qū)別開(kāi)來(lái)，因此可以通過(guò)檢測(cè)—L-經(jīng)脯氨酸含量來(lái)判斷是否有皮革水解蛋白。

【檢測(cè)原理】

通過(guò)對(duì)L(-)-羥脯氨酸含量的測(cè)定，可判定是否為動(dòng)物水解蛋白。皮革水解蛋白中的羥脯氨酸經(jīng)過(guò)提取，與檢測(cè)試劑反應(yīng)生成有色化合物，用檢測(cè)儀測(cè)定其吸光度，在一定范圍內(nèi)吸光度與含量成正比。

【檢測(cè)范圍】

乳制品等

【自備試劑】

氯化亞錫、濃鹽酸、對(duì)二甲氨基苯j(luò)ia醛、高氯酸、異丙醇；

① 氯化亞錫溶ye：7.5g氯化亞錫溶液水中，再加入500ml濃鹽酸；

② 顯色劑：10g對(duì)二甲氨基苯j(luò)ia醛，用35ml高氯酸溶解，加入65ml異丙醇。

【技術(shù)指標(biāo)】

檢測(cè)下限：1mg/kg

【操作方法】

①樣品處理：準(zhǔn)確稱取樣品2g放入250mL磨口三角瓶（自備）中。加幾粒沸石，加入氯化亞錫溶液100mL,置于水浴上加熱回流16h。趁熱將水解溶液過(guò)濾于200mL容量瓶中,用6moL/L熱鹽酸10mL反復(fù)三次沖洗三角瓶和濾紙,冷卻,用水定容到刻度,混勻。吸取5mL水解液于100mL燒杯中,用10mol/L、1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH為8左右,過(guò)濾于250mL容量瓶中,用30mL水沖洗燒杯和濾紙上的氫氧化亞錫沉淀,反復(fù)三次,把洗液并入濾液中,以水洗至刻度,搖勻備用。

② 取兩支試管，試管1中加入2.0mL蒸餾水，試管2中加入2.0mL樣品處理溶液。

③ 分別向兩支試管中加入1.0 mL皮革水解蛋白檢測(cè)液A，搖勻后于室溫放置20min，再分別加入1.0 mL顯色劑，搖勻，塞上塞子于60℃水浴加熱20min后取出,迅速冷卻。將試管1倒入比色皿，將比色皿放入通道，按“對(duì)照測(cè)量”。 將試管2倒入比色皿，將比色皿放入通道中，按“樣品測(cè)量”。

【執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)】

因L(-)-羥脯氨酸為膠原蛋白中的*組分，其含量占10%以上；而乳蛋白中不含有此成分，如若樣品中含有L(-)-羥脯氨酸，可判定添加了動(dòng)物水解蛋白。

【注意事項(xiàng)】

① 所用的檢測(cè)液對(duì)皮膚均具有不同程度的傷害，使用時(shí)請(qǐng)做好防護(hù)。不慎沾到皮膚應(yīng)立即插干并用大量水沖洗

② 檢測(cè)試劑需陰涼處避光保存，冰箱2~5℃保存最佳。

③ 上述檢測(cè)試劑為強(qiáng)腐蝕性，高危險(xiǎn)試劑，需自行配制，配制過(guò)程請(qǐng)做好防護(hù)，例如佩戴防護(hù)手套等。