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當(dāng)前位置:靶點科技(北京)有限公司>>技術(shù)文章>>線栓法MCAO大鼠腦缺血模型的拴線使用制備技巧
背景介紹
大鼠MCAO模型,不成功的一個常見原因,就是栓線插入深度不夠,即栓線的前端未進(jìn)入大腦前動脈(ACA),拴線的粗細(xì)倒是次要的,0.20~0.26mm均可。因此,保證栓線進(jìn)入ACA并阻斷對側(cè)來的血流,而又不刺破血管是重中之重。
如圖1尼龍線光滑的末端,不僅大大減輕了插線對血管內(nèi)皮的損傷,降低了刺穿血管的可能性,而且可以更嚴(yán)密的阻斷從大腦前動脈供應(yīng)的來自對側(cè)的血流,更為可貴的是,因為球端直徑為0.32mm,插線時可以非常方便的插到位(如圖2)。
制備技巧
技巧1:許多文獻(xiàn)報道插入深度為18.5±0.5mm(270g左右大鼠),如果按這一標(biāo)準(zhǔn)去做,而不考慮大鼠的個體差異,后果是缺血的程度參差不齊,很多大鼠會出現(xiàn)癥狀較輕,甚至無癥狀。建議當(dāng)插線近18mm(做上標(biāo)記)時,注意手的感覺,輕緩?fù)七M(jìn),直至感覺到阻力為止(當(dāng)遇到阻力后,再插線會見到線彎曲)。可能有人會說,把血管插破了也未感覺到阻力或線遇阻后的彎曲。一個原因是線太硬(建議選擇Doccol),另一主要原因是當(dāng)栓線從血管切口插入后為防止血液從此處流出,需要結(jié)扎一條細(xì)線,這條線結(jié)扎的松緊程度很關(guān)鍵,應(yīng)在不流血的情況下盡可能的松,這樣你會發(fā)現(xiàn)進(jìn)線時很輕松,一旦遇到阻力,就會感覺到。后者至關(guān)重要,請體會,就是常說的手法或者手感。
技巧2:栓線一旦進(jìn)入ACA,就要把上面提到的那根細(xì)線適度扎緊(“適度"很重要,會影響到再灌流時大鼠的生死存亡),此時的關(guān)鍵是動作輕柔,不要使ICA有任何的牽拉,否則栓線會脫出ACA,可能會造成缺血失敗。血管外的栓線不要留得過長,更不要縫在皮外,大鼠醒來后會自己拔出。
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