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技術(shù)文章

zeta life 轉(zhuǎn)染試劑AD600025可轉(zhuǎn)染RAW264.7細胞

閱讀:740          發(fā)布時間:2022-2-11

簡要描述:

RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑是一種新開發(fā)的試劑,用于將 DNA 和 siRNA 轉(zhuǎn)染到真核細胞系和各種原代細胞中。

RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑

簡要描述:

RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑是一種新開發(fā)的試劑,用于將 DNA 和 siRNA 轉(zhuǎn)染到真核細胞系和各種原代細胞中。

產(chǎn)品介紹

RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑介紹:

進入細胞后可以被代謝的新型小分子多肽轉(zhuǎn)染試劑,對細胞無毒性,不易出現(xiàn)細胞死亡,不激活細胞免疫機制。其特點是非脂質(zhì)體材料,大小是80nm左右,由于形狀是圓形的,不會對細胞有物理性損傷,材料表面有特異性結(jié)合接頭,只特異性識別DNA、RNA,對血清成分(如細胞因子、蛋白、內(nèi)毒素等)不識別也不結(jié)合;特異性接頭與核酸形成轉(zhuǎn)染復合物,轉(zhuǎn)染復合物通過細胞主動吞噬進入細胞,進入細胞后可以被代謝的新型小分子多肽材料,對細胞無內(nèi)毒素影響,不易出現(xiàn)細胞死亡。

一、產(chǎn)品說明:

1、產(chǎn)品名稱

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規(guī)格

貨號:AD600150

規(guī)格:1.5ml

3、儲存條件

常溫運輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復凍融。

二、操作步驟

提 1 天接種細胞:細胞匯合度在 60-80%左右,再進行轉(zhuǎn)染。

核酸復合物制備:將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混勻,室溫靜 止 10-15 分鐘。

在細胞培養(yǎng)基中加入核酸復合物:根據(jù)參考用量在細胞中加入核酸復合物,并輕輕混勻;細胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。

細胞換液:轉(zhuǎn)染 24 小時后對細胞進行正常換液,懸浮細胞轉(zhuǎn)染過程中不用換液。

分析結(jié)果:質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染 48-72 小時后熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩(wěn)定表達細胞株的篩選,則在轉(zhuǎn)染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA 轉(zhuǎn)染后 9 小時熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。

三、RAW264.7轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效果圖和轉(zhuǎn)染條件分享

轉(zhuǎn)染細胞:RAW264.7細胞;

培養(yǎng)板:12孔板;

轉(zhuǎn)染時間:48小時;

轉(zhuǎn)染細胞起始數(shù)量: 電訊;

轉(zhuǎn)染試劑用量:電訊;

轉(zhuǎn)染試劑:Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑;

培養(yǎng)細胞使用血清:Zeta Life,Z7180FBS-500超低內(nèi)毒胎牛血清



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