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qPCR-實(shí)時(shí)熒光定量PCR探針法與染料法的優(yōu)缺點(diǎn)

閱讀:980          發(fā)布時(shí)間:2022-8-16

qPCR


即實(shí)時(shí)熒光定量PCR,就是在PCR的擴(kuò)增過程中,通過熒光的信號(hào),對(duì)PCR的進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)的定性、定量檢測(cè)。



探針法與染料法的優(yōu)缺點(diǎn)


1. 探針法通過探針可以增加反應(yīng)收集信號(hào)的特異性,只有探針結(jié)合的片段上發(fā)生擴(kuò)增才能收集到信號(hào),能夠用多重體系反應(yīng)的方法,能夠預(yù)測(cè)和提前進(jìn)行反應(yīng)條件的優(yōu)化,缺點(diǎn)是要合成探針,成本高,周期長。

2. 染料法經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,可以做溶解曲線,分析全部PCR產(chǎn)物的TM值,缺點(diǎn)就是特異性沒有探針法好。



結(jié)果展示




qPCR(圖1)qPCR(圖2)


實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn)


實(shí)驗(yàn)周期:1-2周

交付標(biāo)準(zhǔn):擴(kuò)增曲線、溶解曲線、Ct值、引物、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器等)



需確認(rèn)的信息


1. 目的基因及種屬

2. 樣本種屬及類型(組織、細(xì)胞等)

3. 樣本數(shù)量

4. 是否提供引物

5. 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析要求


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