試劑盒應(yīng)用

本試劑盒采用裂解液配方在10 分鐘內(nèi)完成植物葉片、種子等的裂解、提取和純化。提取對(duì)象包

括水稻、玉米、小麥等作物，也包括多糖多酚類植物（例如棉花、馬鈴薯、鐵皮石斛等）。整個(gè)提

取過(guò)無(wú)需使用蛋白酶K 等酶類制劑。提取DNA 可用于PCR、qPCR、Sorthern Blot、分子克隆、文

庫(kù)構(gòu)建等。

本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

試劑盒組成

保存條件

室溫保存一年。

自備材料

無(wú)水乙醇、無(wú)DNase 和無(wú)RNase 離心管、β-巰基乙醇（選用）、RNaseA（10mg/mL，或貨號(hào)QR0101）

使用方法

1. 液氮研磨新鮮植物樣本（如葉片、種子、花蕊約20-100mg），加入700μL 裂解液DP，充分混勻，

室溫靜置1 分鐘。

備注：多糖多酚類樣本，每700μL 裂解液DP 中加入14μLβ-巰基乙醇，從而提高RNA 得率。

2. （選做）加入5μL RNase A（10mg/mL），室溫靜置5-10 分鐘。

3. 加入0.5 倍體積無(wú)水乙醇，上下顛倒混勻，12,000rpm 離心1 分鐘。

4. 取700μL 上清加入DNA 吸附柱中，12,000rpm 離心30 秒，倒掉收集管中廢液。

5. 向DNA 吸附柱中加入500μL 洗滌液DWA，12,000rpm 離心1 分鐘，倒掉收集管中廢液。

6. 向DNA 吸附柱中加入500μL 洗滌液DWB，12,000rpm 離心30 秒，倒掉收集管中廢液。

7. 重復(fù)步驟6 一次。

8. 12,000rpm 離心2 分鐘，倒掉收集管中廢液。

9 將DNA 吸附柱放入新無(wú)DNase 和無(wú)RNase 離心管中，加入30-50μL 洗脫液P，室溫放置1 分鐘。

10. 12,000rpm 離心2 分鐘，得到DNA 溶液，-80℃保存。

注意事項(xiàng)

1. 經(jīng)常更換手套，防止DNA 污染。

2. 使用無(wú)DNase 無(wú)RNase 的吸頭和離心管，防止DNA 降解。

3. 常更換吸頭，防止交叉污染。

4. 動(dòng)作輕柔，防止基因組DNA 斷裂。

5. 為了提高洗脫效率，可提前將洗脫液P 置于65℃水浴后再使用。