ScienCell胎牛血清
貨號:0500
規(guī)格:500ml
千舍生物開工大吉,干細胞專用,特級胎牛血清*......
01、復蘇細胞的正確打開方式?
復蘇過程應快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結晶。凍存細胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在1 分鐘內全部融化(不要超過3 分鐘)。解凍后的細胞可以直接接種到含有*培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng),24小時后再用新鮮*培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。
如果細胞對冷凍保護劑特別敏感,解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑,然后再接種到含*生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。注:操作時戴好手套,防止凍傷;帶上防護眼鏡可以防止液氮罐里剛剛拿出來的管子液氮爆炸……
WINSERA® Fetal Bovine Serum 胎牛血清目錄如下:
WINSERA®胎牛血清 | 貨號 | 規(guī)格 | 庫存狀態(tài) |
優(yōu)級 | FBS500-WS-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
特級 | FBS500-WP-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
ES級別 | FBS500-WE-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
無外泌體血清 | FBS050-EXO | 500ML | 現(xiàn)貨 |
02、細胞培養(yǎng)時能否更換培養(yǎng)基種類?
首先得確定現(xiàn)在用的培養(yǎng)基是否適合您的細胞生長。細胞培養(yǎng)過程中,細胞增殖和形態(tài)正常的情況下最好不要更換培養(yǎng)基,細胞都有各自適應的培養(yǎng)基,更換培養(yǎng)條件,細胞可能無法快速適應,導致細胞死亡。若必須更換,可嘗試半換,讓細胞逐漸適應新的培養(yǎng)基。
更換培養(yǎng)基的方法:
如果是貼壁生長的細胞, 一般可以直接把培養(yǎng)液吸掉, 再加入新的。加的時候注意不要對著長細胞的那一面。
如果是懸浮型的, 就需要低速離心 (把所有的細胞和培養(yǎng)液轉移到離心管里, 或有些離心機配有直接離心細胞培養(yǎng)皿的裝置), 然后再吸掉上清液。加入新的培養(yǎng)液使細胞重新懸浮。
03、細胞培養(yǎng)時能否更換胎牛血清?
首先要確定更換胎牛血清的理由,如果細胞培養(yǎng)無異常的話,不建議隨意更換不同品牌和來源的胎牛血清。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的來源(血源地)和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同地域和等級的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞死亡。
如果是使用的胎牛血清出現(xiàn)了問題,比如保存不當或操作不當導致血清成分析出、混濁、污染等情況,可以優(yōu)先更換同品牌、等級、批次的血清;如果是產(chǎn)品質量問題更換血清品牌的話,需要用一批細胞進行預實驗才行,以保證細胞能夠正常培養(yǎng)。
另外在購買胎牛血清的時候要選擇正規(guī)來源和經(jīng)過海關檢疫胎牛血清,非正規(guī)來源的胎牛血清有很多安全隱患,對實驗室、操作人員、細胞培養(yǎng)、實驗數(shù)據(jù)都有很大的影響。
04、一般在拿到細胞后,應該注意什么?
收到細胞后先不要開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議對收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況一般可以再申請免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制。
05、培養(yǎng)細胞什么時候需要換液?
視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。
06、培養(yǎng)基到底要不要加抗生素?
除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應添加任何抗生素。如果是沒有進行過細胞培養(yǎng)的新手,對無菌技術沒有信心的,或者提取的原代細胞,怕污染的,可以適量添加抗生素??股乇旧硪彩怯卸拘缘?,有些抗生素的藥效濃度水平與毒效濃度水平非常接近,對細胞多少有傷害。
07、培養(yǎng)箱二氧化碳使用比例如何判定?
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養(yǎng)時應使用10%CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應使用5CO2培養(yǎng)細胞。
08、L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)中重要嗎?
L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有最終定論。L-谷氨酰胺的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
09、培養(yǎng)基里的粉紅色是什么?
酚紅一般作為培養(yǎng)基中pH值的指標:當培養(yǎng)基呈中性時為紅色,呈酸性時為黃色,堿性時為紫色。另外,酚紅可以模擬類固醇激素(特別是雌激素)的作用。如果要避免類固醇反應,可以在無酚紅的培養(yǎng)基里進行培養(yǎng)。
10、胰酶里EDTA的作用?
二價的離子會抑制胰酶活性,所以加入EDTA可以螯合掉Ca、Mg這樣的二價離子。胰酶也要注意不要反復凍融。
11、如何避免細胞培養(yǎng)過程中的污染?
主要還是考慮無菌環(huán)境,盡量做好操作臺的滅菌,別把培養(yǎng)基滴落在生物安全柜的入風口,別在培養(yǎng)箱里把培養(yǎng)基打翻。這兩個地方霉菌一旦滋生,那你就只能等著用甲醛熏蒸了。
紫外無法殺滅霉菌,酒精也不行,只能用甲醛熏蒸,但是一定要注意安全。復蘇的時候,水浴鍋也需要進行滅菌處理。一旦出現(xiàn)污染,不要急,能救的就用抗生素救一下,但是一般情況下,選擇扔掉。避免交叉感染,要不只能整個實驗室消毒了。
ScienCell胎牛血清
人 SV40 轉染成骨細胞 HFOB1.19
人胃癌細胞 HGC-27
人腎皮質近曲小管上皮細胞 HK-2
人腎上皮細胞 HKb-20
人早幼粒白血病細胞 HL 60(hl-60)
人肝細胞 HL-7702[L-02]
人小膠質細胞 HMC3
人高轉移卵巢癌細胞 HO-8910PM
人骨肉瘤細胞 HOS
人胰腺癌細胞 HPAC
人胎盤細胞(有限細胞系) Hs 815.Pl
人乳腺癌細胞 HS578T
人腦膠質瘤細胞 HS683
人真皮成纖維細胞(原代細胞永生化) HSF(SV40)
人纖維肉瘤細胞 HT-1080
人膀胱癌細胞 HT-1376
人結腸癌細胞 HT-29 (HT29)
人眼小梁網(wǎng)細胞 HTMC
人胰腺導管細胞 HPNE
人肝母細胞瘤細胞 HUH-6
人肝癌細胞 huh-7
人肝癌細胞 huh-7.5.1
人T淋巴細胞白血病細胞 HUT-78
人十二脂腸腺癌 HUTU-80
人臍靜脈內皮細胞(原代細胞永生化) HUVEC
人臍靜脈內皮細胞 HUV-EC-C
人臍靜脈內皮細胞永生化+RFP HUVEC+RFP
人臍靜脈內皮細胞永生化+GFP HUVEC+GFP
人誘導多能干細胞 iPS
人子宮內膜癌細胞 Ishikawa
人正常卵巢上皮細胞系 IOSE-80(IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN)
人胚肺成纖維細胞 IMR-90
人急性T細胞白血病細胞 J.gamma1
人膀胱移行細胞癌 J82
人胎盤絨毛癌細胞 JAR
人胰腺癌細胞 JF-305
人絨毛膜癌細胞 JEG-3
人T淋巴細胞白血病細胞 Jurkat(clone E6-1)
人慢性骨髓性白血病細胞系 K562
人K562耐阿霉素細胞株 K562/ADR
人口腔表皮癌細胞 KB
人急性髓性白血病細胞 KG-1a
人卵巢顆粒細胞瘤細胞 KGN
人腦膠質細胞瘤細胞 KNS-89
人外周血嗜堿性白血病細胞 KU812
人食道癌細胞 kyse30
人肝癌細胞 Li-7
人膠質瘤細胞 LN229
人前列腺癌細胞 LNCaP clone FGC
人結直腸癌細胞 lovo
人結直腸癌細胞氟尿嘧啶耐藥株 LOVO/5FU
人結直腸癌細胞熒光素酶標記 LOVO+LUC
人結直腸腺癌細胞 LS174T
人結直腸癌細胞 LS180
人結直腸癌細胞 LS513
人肝星形細胞 LX-2
人乳腺上皮細胞 MCF-10A
人乳腺癌細胞 MCF-7
人乳腺癌阿霉素耐藥細胞 MCF-7/Adr
人乳腺癌細胞熒光素酶標記 MCF-7+luc
人乳腺細胞 MDA-KB2
人乳腺癌細胞 MDA-MB-231
人乳腺癌X細胞+GFP MDA-MB-231+GFP
人乳腺癌細胞熒光素酶標記 MDA-MB-231+LUC
人乳腺癌細胞 MDA-MB-361
人黑素瘤細胞 MDA-MB-435S
人乳腺癌細胞 MDA-MB-436
人乳腺癌細胞 MDA-MB-453
人乳腺癌細胞 MDA-MB-468
人子宮頸表皮癌細胞 ME-180
人膜間皮細胞 MET-5A
人骨肉瘤細胞 MG63
人胃癌細胞 MGC-803
人高轉移性肝癌細胞 MHCC-97H
人高轉移性肝癌細胞熒光素酶標記 MHCC-97H+luc
人高轉移性肝癌細胞 MHCC-97L
人胰腺癌細胞 MIA-PACA-2
人胃癌細胞 MKN-45
人多發(fā)性骨髓瘤細胞 MM.1R
人多發(fā)性骨髓瘤細胞 MM.1S
人急性淋巴母細胞白血病細胞 MOLT-4
人胚肺成纖維細胞 MRC-5(有限細胞系)
人急性淋巴母細胞白血病細胞 MT-4