您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)! 登錄| 免費注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:天津博達(dá)宏力科技發(fā)展有限公司>>技術(shù)文章>>美國奧豪斯離心機怎么樣
美國奧豪斯離心機怎么樣,介紹如下:
1. 取含有噬菌粒的TG1菌種1ml (菌數(shù)目為1E10)加入含有100ml 2xYT-GA培養(yǎng)基250ml搖瓶中,使用奧豪斯搖床37度220rpm搖菌搖床至OD600為約0.5。
2. 取OD600為約0.5的菌液20ml (菌數(shù)目為1E10),按照MOI為20:1加入pfu為2E11的輔助噬菌體M13 K07,37度220rpm振蕩半小時進行感染。
3. 取感染后菌液到50ml離心管使用奧豪斯離心機5816R 3200g離心10分鐘,去除培養(yǎng)基,以除去培養(yǎng)基中的葡萄糖對噬菌粒中p3蛋白融合了抗體片段蛋白表達(dá)的抑制。
4. 用2xYT-AK培養(yǎng)基重懸菌團,將培養(yǎng)基加至400ml,用1L搖瓶在30度220rpm過夜搖菌。
5. 將400ml菌液均分至大的離心瓶中,使用奧豪斯離心機5816R 10000g離心10分鐘,取上清,10000g再次離心10分鐘,去除殘留的菌體碎片。
6. 取90ml PEG溶液加入400ml上清液中,在4℃孵育1小時并伴隨著柔和的振蕩,然后使用帶低溫控制功能的奧豪斯離心機5816R 4℃10000g離心1小時。
7. 去上清,用10mlPBS重懸噬菌體后,加入2.5ml PEG溶液再次沉淀.
8. 冰上孵育20分鐘,然后使用帶低溫控制功能的奧豪斯離心機5816R 4℃ 10000g離心半小時。
9. 去上清液,用吸水紙吸干殘留的PEG溶液,加入1-2ml的PBS重懸噬菌體,進行滴度測定。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。