詳細(xì)介紹
一、什么是外泌體?
外泌體(Exosomes)是細(xì)胞外囊泡(Extracellular vesicles, EVs)的一種,大小在30-150nm,由細(xì)胞內(nèi)的多泡小體(Multivesicular bodies,MVB)與細(xì)胞膜融合后以外分泌的形式釋放到細(xì)胞外,廣泛存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,包括血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁等。
二、外泌體的常規(guī)存儲(chǔ)條件有哪些?
實(shí)驗(yàn)室中常規(guī)的外泌體存儲(chǔ)條件一般是4℃、-20℃、-80℃。在一項(xiàng)研究中[1] ,研究者評(píng)估了儲(chǔ)存在4℃,-20℃和-80℃下長(zhǎng)達(dá)28天的外泌體的穩(wěn)定性,并將其與新鮮的外泌體進(jìn)行了比較。研究者發(fā)現(xiàn),與新鮮分離的外泌體相比,不同的存儲(chǔ)溫度和存儲(chǔ)時(shí)間會(huì)影響外泌體的穩(wěn)定性、大小分布和顆粒數(shù)量(Fig.1),并影響了外泌體的細(xì)胞吸收和生物分布(Fig.2)。對(duì)于功能性研究,根據(jù)研究設(shè)計(jì)建議對(duì)新鮮分離的外泌體進(jìn)行立刻分析或在4 ℃或-20℃下短期保存后使用。但是對(duì)于長(zhǎng)期保存用于治療應(yīng)用的外泌體,-80℃存儲(chǔ)條件將是更可取的。
外泌體作為治療試劑或藥物遞送載體有廣泛的應(yīng)用前景,但外泌體存儲(chǔ)在-80°C將不利于其運(yùn)輸及應(yīng)用,因此還需要其他存儲(chǔ)方法。凍干是一種已用于保存多種類型的生物材料(蛋白質(zhì),血漿、活細(xì)胞等)的技術(shù)。此外,凍干技術(shù)已被用于改善藥物遞送載體脂質(zhì)體的長(zhǎng)期穩(wěn)定性。因此,凍干技術(shù)有可能改善外泌體的保存穩(wěn)定性,如果凍干的外泌體可以在室溫條件下穩(wěn)定保存,外泌體的應(yīng)用范圍則將會(huì)大大提升。