凍干標(biāo)準(zhǔn)-紅綠雙標(biāo)記熒光外泌體

細(xì)胞外囊泡（EVs）是一種納米級細(xì)胞間信使，作為生物藥物遞送載體具有巨大的應(yīng)用潛力。利用基因工程供體細(xì)胞用蛋白質(zhì)、肽或 RNA 裝載或裝飾 EV 已經(jīng)取得了很大進展，但分離后裝載合成藥物和使用天然來源的 EV 仍具有挑戰(zhàn)性。特別是，目前仍缺乏定量和明確的數(shù)據(jù)來評估小分子與樣品中其他成分相比是否以及如何與 EVs 結(jié)合。在這里，我們描述了基于疏水相互作用的小分子被動EV負(fù)載的系統(tǒng)性和定量特征--無論是通過疏水化合物的直接吸附，還是通過標(biāo)簽親水配體的膜錨定。單囊泡成像顯示，這兩種配體都能與 CD63 陽性的 EV（外泌體）結(jié)合，但也能非特異性地與其他囊泡、顆粒和血清蛋白結(jié)合。疏水性化合物姜黃素和特比萘芬聚集在EV上，沒有明顯的飽和現(xiàn)象，液相色譜-高分辨質(zhì)譜（LC-HRMS）定量顯示，每個囊泡可聚集106-107個分子。通過定量冷凍透射電子顯微鏡（TEM）檢測，這兩種化合物的高密度 EV 負(fù)載會導(dǎo)致形成大量電子致密的大囊泡，降低 EV 細(xì)胞的攝取量，并使姜黃素-EV 的功能獲得毒性。