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Chelex 100螯合樹脂由Bio-Rad公司生產(chǎn),主要用于實(shí)驗(yàn)室中金屬離子的分離和純化。它是一種弱陽(yáng)離子交換樹脂,其基質(zhì)是聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物。樹脂的官能團(tuán)是亞氨基二乙酸基團(tuán)(R–CH2N(CH2COO–)2),這使得它能夠有效地螯合多價(jià)金屬離子,尤其是二價(jià)陽(yáng)離子如銅、鐵和其他重金屬,而對(duì)一價(jià)陽(yáng)離子如鈉和鉀的選擇性較低。
Chelex 100螯合樹脂因其優(yōu)秀的性能,在生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用。其中最著名的一個(gè)應(yīng)用是在DNA提取過(guò)程中。傳統(tǒng)的DNA提取方法可能需要使用有毒的有機(jī)溶劑或者復(fù)雜的離心步驟,而Chelex 100提供了一種簡(jiǎn)單且相對(duì)溫和的方法來(lái)釋放和純化細(xì)胞內(nèi)的DNA。在DNA提取中,Chelex 100螯合樹脂能夠結(jié)合并移除樣品中的金屬離子,這些金屬離子通常會(huì)抑制DNA聚合酶的活性,從而影響后續(xù)的PCR反應(yīng)。通過(guò)使用Chelex 100螯合樹脂,可以避免使用蛋白酶K和酚/氯仿提取等傳統(tǒng)步驟,簡(jiǎn)化了DNA提取過(guò)程。
Chelex 100螯合樹脂的使用通常涉及到將樣品與一定濃度的Chelex 100溶液混合,加熱以破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),使DNA釋放出來(lái),然后通過(guò)離心分離樹脂和DNA溶液。金屬離子被樹脂螯合,而DNA則留在上清液中,可以直接用于下游的分子生物學(xué)分析,如PCR或測(cè)序。
此外,Chelex 100螯合樹脂還被用于水樣分析、金屬離子的定量分析以及減少培養(yǎng)基中特定金屬離子(如鈣和鎂)的濃度,以控制細(xì)胞培養(yǎng)條件。在一些情況下,可以通過(guò)洗脫樹脂來(lái)回收金屬離子,例如使用硝酸溶液洗脫,這在金屬回收和環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域也有應(yīng)用。
總的來(lái)說(shuō),Chelex 100螯合樹脂作為一種多功能的螯合樹脂,其在化學(xué)分離純化堿土金屬,元素同位素等科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用中都發(fā)揮著重要作用
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