一、培養(yǎng)基與染料

  培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）以及生長(zhǎng)素和水等。有的培養(yǎng)基還含有染料、抗菌素、激素和血清等。不同的培養(yǎng)基需要添加的染料不同，常用的染料有中性紅、苯fen紅、溴jia酚紫、結(jié)晶紫、溴麝香草酚藍(lán)、品紅、伊紅、美蘭、孔雀綠等。經(jīng)常見(jiàn)到有的人在配制培養(yǎng)基的過(guò)程中，其他成分都溶解了，最后加染料后，溶解不徹-底的情況，結(jié)果不得不重新配制，往往重復(fù)幾次依然找不到原因，既浪費(fèi)了原料，又耽誤了時(shí)間，影響試驗(yàn)的順利進(jìn)行。本文主要就培養(yǎng)基中染料的溶解方式做簡(jiǎn)單介紹，希望能給大家提供幫助。

 

二、染料的分類

  根據(jù)染料的溶解媒介，可以將常用染料大致分為3類：水溶性染料、醇溶性染料和堿溶性染料。顧名思義，水溶性染料就是指只用純水就能完-全溶解，形成透明溶液的染料；而醇溶性染料和堿溶性染料則需要分別在醇類或堿性介質(zhì)中才能進(jìn)行徹-底溶解，如果只用水是不能溶解的（如圖1）。生物實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的染料溶解特性相關(guān)內(nèi)容，可參考

圖1-1 中性紅在水中的溶解狀態(tài)

圖1-2 苯fen紅在水和稀堿溶液中的溶解狀態(tài)

圖1-3 溴甲fen紫在水和乙醇中的溶解狀態(tài)

圖1 三種染料在不同溶劑中的溶解狀態(tài)

 

三、溶解介質(zhì)對(duì)培養(yǎng)基的影響

  經(jīng)常有人會(huì)質(zhì)疑，如果培養(yǎng)基中加入了過(guò)多的非水溶劑（乙醇或堿液），是否會(huì)對(duì)培養(yǎng)基的性能造成影響，至少會(huì)引起培養(yǎng)基的pH值變化。

  首先，在配制染料溶液時(shí)，并不是全部的溶劑都用乙醇或堿液，通常只需滴加幾滴或幾毫升溶劑，讓染料充分溶解，分散開(kāi)以后，再用純化水定容至所需容量就可以了。

  其次，培養(yǎng)基中染料的添加量是很少的，尤其是做成母液后使用，每升培養(yǎng)基中只需加幾毫升甚至更少，引入的乙醇或堿液很少。

  另外，乙醇不會(huì)引起培養(yǎng)基pH值變化，少量堿液就算會(huì)引起pH稍有影響，配制好了再微調(diào)一下就行了。正常配制培養(yǎng)基，也都要用稀酸或稀堿對(duì)pH進(jìn)行調(diào)節(jié)的。

  綜合來(lái)看，少量非水溶劑對(duì)培養(yǎng)基本身造成的影響可以忽略不計(jì)。

 

四、具體操作

  下面以苯fen紅為例，詳細(xì)說(shuō)明一下染料溶液的配制過(guò)程。

  （1）首先，查一下苯fen紅的特性：苯fen紅為鮮紅至深紅色結(jié)晶或細(xì)小結(jié)晶性粉末，在空氣中穩(wěn)定；1g溶于約1300mL水，約350mL乙醇，500mL丙酮；易溶于氫氧hua鈉或碳酸鈉溶液中呈紅色，與鋅fen共沸褪色；幾乎不溶于yi醚和氯f(wàn)ang。

  經(jīng)確認(rèn)，該染料為堿溶性染料，準(zhǔn)備好稀堿溶液（本實(shí)驗(yàn)室通常用1mol/L的NaOH或Na₂CO₃）；

  （2）稱量所需染料至玻璃容器（錐形瓶或燒杯），如圖2-1；

圖2-1 容器中的染料

（3）滴入幾滴堿液，輕輕搖晃容器，直至染料均勻分散，無(wú)顆粒物，如圖2-2；

圖2-2 滴入堿液并搖晃后，染料的狀態(tài)

（4）用純化水定容至所需容積，搖勻即可備用，如圖2-3。

圖2-3 溶解好的染料溶液

 

五、補(bǔ)充說(shuō)明

  實(shí)驗(yàn)過(guò)程中常用的染料都可以用上面的方法進(jìn)行溶液配制。有些染料本身是水溶性的，熱水中溶解度更高，可以稍稍加熱促進(jìn)其溶解。但對(duì)于需要醇溶或堿溶的染料，如果只用水，即使加熱也達(dá)不到溶解的目的。所以首先要選對(duì)溶劑，這一點(diǎn)非常重要。如果濃度太大，有少量顆粒，還可以借助超聲儀進(jìn)行溶解。

 

 

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