由于細(xì)菌鞭毛極易從菌體脫落，因此常有客戶因?yàn)槿旧珪r(shí)的操作不小心導(dǎo)致染色失敗，無法觀察到細(xì)菌鞭毛，在此列舉幾條鞭毛染色時(shí)的注意事項(xiàng)。

一、細(xì)菌培養(yǎng)物

1.細(xì)菌最好在染色前多傳代幾次，以增強(qiáng)菌的活力，經(jīng)有關(guān)文獻(xiàn)表明，傳代三次的菌染色效果好。

2.染色使用的細(xì)菌在培養(yǎng)基上的培養(yǎng)時(shí)間最好在6-8個(gè)小時(shí)，選取幼靈菌的原因是老齡菌的鞭毛極易脫落。

3.挑取菌落時(shí)最好選取邊緣菌落，因?yàn)榇颂幍木浠顒?dòng)能力強(qiáng)容易找到鞭毛。

4.挑取菌的菌量不宜過大，寧少勿多，否則菌落重疊不易觀察。

二、細(xì)菌制片

1.涂片時(shí)玻片必須干凈，染色前用洗衣粉洗凈并在酒精中浸泡24h，用前擦拭干凈后使用。

2.將菌落輕點(diǎn)在玻片上，傾斜玻片讓菌液自然留下，不要用接種環(huán)涂抹或用力過猛，以免破壞鞭毛。

3.挑取菌的時(shí)候盡量不要帶有培養(yǎng)基。

4.玻片上菌液需自然干燥或在溫箱中烘干。

5.水洗時(shí)需緩慢沖洗，直接用蒸餾水沖洗染液，不要先傾去染液后再水洗，以免污染背景不易觀察，沖洗時(shí)要將染液的顏色沖洗干凈否則也會(huì)影響觀察。

三、鏡檢觀察

鏡檢時(shí)先從邊緣開始逐漸向中間鏡檢，因?yàn)檫吘壧幘啃?，易觀察到單菌落，中心處菌易重疊，不易觀察。