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如何選擇透析袋?我來(lái)告訴你!
閱讀:5404 發(fā)布時(shí)間:2015-5-10
一、透析袋的區(qū)別 | |||||||||||||||||||
纖維素透析袋 | 再生纖維素透析袋 | 普通型透析袋 | |||||||||||||||||
分子量 | 100-500,500-1000,5k,10k,20k,50k,100k,300k | 1k,2k,3.5k,8k,10k,25k,50k | 3.5k,7k,8-14k | ||||||||||||||||
化學(xué)兼容性 | 適用于:甲醇,乙醇和異丙醇等低碳醇(短時(shí)間、低濃度)。不適用于:強(qiáng)極性溶劑(如丙酮,甲乙酮,二惡烷) | 適用于:烴,鹵代烴,醇,酮,酯,氧化物,含氮溶劑。不適用于:鹽酸(濃度>25%),硝酸(濃度>25%),96%硫酸,25%高氯酸,1N氫氧化鉀和10%的苯酚水溶液。 | 與很多鹽兼容,比如CaCl2、(NH4)2SO4,還可與分子生物學(xué)和酶學(xué)常用的水溶劑和有機(jī)溶劑兼容,如異丙醇、乙醇、丙酮。 | ||||||||||||||||
有機(jī)抗性 | 中等 | 好 | 好 | ||||||||||||||||
污染物水平 | 不含重金屬和硫化物 | 不含重金屬和硫化物 | 硫化物<0.3%,重金屬<50ppm | ||||||||||||||||
包裝 | 濕型,0.05%* | 濕型,0.05%* | 干型 | ||||||||||||||||
扁平寬度 | 10,16,24,31mm | 10,12,18,24,28,38,45,50,53mm | 25,34,44,77mm | ||||||||||||||||
PH范圍 | 2-9 | 2-12 | 5-9 | ||||||||||||||||
溫度限度 | 37℃ | 60℃ | 可煮沸,可高壓滅菌 | ||||||||||||||||
預(yù)處理 | 無(wú)需預(yù)處理,只需用蒸餾水清洗即可使用 | 無(wú)需預(yù)處理,只需用蒸餾水清洗即可使用 | 在沸水或 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘 | ||||||||||||||||
二、透析袋應(yīng)用: | |||||||||||||||||||
去除鹽類,表面活性劑和溶劑 | |||||||||||||||||||
樣品溶液的緩沖液置換和PH值的調(diào)節(jié) | |||||||||||||||||||
濃縮蛋白質(zhì),多肽和抗體 | |||||||||||||||||||
DNA電洗脫 | |||||||||||||||||||
電泳前稀釋蛋白的制備 | |||||||||||||||||||
小分子污染物清除 | |||||||||||||||||||
結(jié)合研究 | |||||||||||||||||||
組織培養(yǎng)的提取純化 | |||||||||||||||||||
三、透析袋的選擇: | |||||||||||||||||||
正確選擇合適的截留分子量 | |||||||||||||||||||
截留分子量的選擇是以預(yù)留在膜內(nèi)的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎(chǔ)的。為達(dá)到合理有效的分離,需分離的兩種物質(zhì)分子量的比率至少為25. | |||||||||||||||||||
選擇截留分子量的經(jīng)驗(yàn)法則:選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留率。 | |||||||||||||||||||
正確選擇扁平寬度 | |||||||||||||||||||
透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管因擴(kuò)散距離較長(zhǎng)透析較慢。為易于使用,建議使用總長(zhǎng)(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15厘米的透析袋 | |||||||||||||||||||
透析袋的化學(xué)相容性 | |||||||||||||||||||
化學(xué)相容性主要用作使用指導(dǎo),不作為化學(xué)相容的保證。溫度,濃度,長(zhǎng)時(shí)間曝光等因素的改變可能影響產(chǎn)品的使用。建議您自設(shè)條件進(jìn)行測(cè)試。 | |||||||||||||||||||
四、透析袋的使用: | |||||||||||||||||||
下述透析程序是一個(gè)普遍的基礎(chǔ)透析過(guò)程。在開(kāi)始透析之前應(yīng)考慮到許多變數(shù)。透析樣品溶劑、膜的化學(xué)相容性、膜的截留分子量,透析溶劑、透析體積、溫度等變量都會(huì)影響透析速率,因此,一些應(yīng)用中下述透析過(guò)程可能需要適當(dāng)?shù)淖兓?/TD> | |||||||||||||||||||
1. 把適量的透析液(緩沖液)加入透析裝置。透析液的體積應(yīng)為樣品體積量的100倍。(例如:在一升透析液中透析10毫升的樣品) | |||||||||||||||||||
2. 裁剪適當(dāng)長(zhǎng)度的透析管。預(yù)留一段額外長(zhǎng)度(約占總樣品體積量的20%)作為頭部空間。 | |||||||||||||||||||
3. 把透析管插入打開(kāi)的透析夾,在約超出透析夾3-5毫米的位置再夾住。不要折疊透析袋。 | |||||||||||||||||||
4. 由透析管開(kāi)口端將樣品裝入。調(diào)整一下頂部空間的長(zhǎng)度,夾緊透析夾。 | |||||||||||||||||||
5. 把透析樣品放在合適的透析緩沖液中。 | |||||||||||||||||||
6. 透析要根據(jù)具體的應(yīng)用需求。通常情況下,允許24小時(shí)透析。在持續(xù)透析的過(guò)程中,至少要進(jìn)行3次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4小時(shí),6-8小時(shí)和10-14小時(shí)(第2天早晨)更換透析液。在zui后一次透析液的更換后要至少繼續(xù)進(jìn)行2小時(shí)的透析。 | |||||||||||||||||||
注:對(duì)于高濃度污染物,樣品可能需要較長(zhǎng)的時(shí)間透析,透析液需要更頻繁的更換。 | |||||||||||||||||||
7. 透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá)37℃,再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá)60℃。 | |||||||||||||||||||
五、透析袋的貯存和保質(zhì)期: | |||||||||||||||||||
在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存情條件下,保質(zhì)期為兩年。干燥的透析袋要在室溫或4℃儲(chǔ)存在聚乙烯袋中。未開(kāi)封的透析袋4℃儲(chǔ)存。一旦變濕,透析袋應(yīng)浸泡在下列之一的溶液中:0.05%*,1%的苯甲酸鈉或1%甲醛。(備注:一旦變潮濕,不要讓透析袋干燥。不斷干燥會(huì)造成孔隙結(jié)構(gòu)不可恢復(fù)的倒塌) |