活細(xì)胞成像系統(tǒng)在實(shí)際應(yīng)用上有哪些功能?
閱讀:827 發(fā)布時(shí)間:2020-9-15
活細(xì)胞成像系統(tǒng)是用于活細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間、高清晰度、高靈敏度成像的設(shè)備。當(dāng)用活細(xì)胞染料標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)特定生物大分子,或者使用熒光蛋白標(biāo)記體內(nèi)特定蛋白時(shí),使用該熒光染料或者熒光分子特定的激發(fā)光線激發(fā),通過探測(cè)其特用的發(fā)射光線即可探測(cè)到該生物大分子?;罴?xì)胞成像系統(tǒng)一方面控制細(xì)胞生存的外部環(huán)境,提供合適的溫度、適度和pH,讓細(xì)胞處于好的狀態(tài)。另外一方面通過高靈敏度CCD捕捉細(xì)胞中的微弱熒光,長(zhǎng)時(shí)間觀察細(xì)胞中的熒光分子的運(yùn)動(dòng),具體揭示細(xì)胞間或細(xì)胞內(nèi)生物大分子的變化過程。
主要用途:
針對(duì)活細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境的條件下,進(jìn)行顯微成像采集定時(shí)拍攝,在白光或熒光下觀測(cè)活細(xì)胞的增殖細(xì)胞遷移粘附等等進(jìn)行細(xì)胞分析成像;實(shí)現(xiàn)在細(xì)胞水平上的定性和定量分析、活細(xì)胞圖像處理、活細(xì)胞動(dòng)態(tài)示蹤。在分子水平,可做到基因定位定量表達(dá)的動(dòng)態(tài)分析、蛋白質(zhì)合成降解運(yùn)輸和相互作用的動(dòng)態(tài)研究、細(xì)胞骨架的代謝動(dòng)力學(xué)測(cè)定和細(xì)胞周期各時(shí)相的動(dòng)態(tài)觀察等。

活細(xì)胞成像系統(tǒng)的主要功能為:
1、多維成像:目前可以做到六維成像。通過光學(xué)切片技術(shù),實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的3D觀察,構(gòu)建樣品的立體結(jié)構(gòu)。
2、3D還原型反卷積處理:顯微鏡的分辨率和圖像的對(duì)比度取決于物鏡收集的光學(xué)信息。顯微鏡光路中衍射和折射現(xiàn)象的存在,使得樣品信號(hào)的位置和強(qiáng)度都發(fā)生了變化,降低了系統(tǒng)的分辨率和圖像的質(zhì)量。API作為對(duì)圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行反卷積處理早的實(shí)踐者,將顯微鏡的硬件設(shè)計(jì)和后期軟件處理結(jié)合在一起,通過對(duì)光學(xué)信號(hào)的3D還原型反卷積處理,大大提高了顯微鏡的靈敏度和分辨率。
3、延時(shí)攝影: 通過軟件jing確的控制,拍攝的時(shí)間間隔從數(shù)秒到數(shù)小時(shí)不等,在長(zhǎng)時(shí)間拍攝下也不會(huì)造成熒光信號(hào)的淬滅。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求的不同,無論單一層面還是三維結(jié)構(gòu),都可以獲得良好的效果。
4、高速離子成像:結(jié)合高速CCD和高效的光路,在512×512像素下仍然可以實(shí)現(xiàn)21幀/秒的成像速度。對(duì)于快速的離子濃度的變化,zui快可以50-100幀/秒的速度獲取圖像。
5、熒光共定位分析:通過比較多個(gè)熒光通道的定位情況,即可知道他們?cè)诳臻g上和時(shí)間上的分布信息,進(jìn)而得到相應(yīng)的熒光信號(hào)是否存在相互作用、協(xié)同運(yùn)動(dòng)、定向運(yùn)輸?shù)取?/div>
6、熒光共振能量轉(zhuǎn)移:DeltaVision特制的活細(xì)胞濾片組保證CFP/YFP,GFP/mCherry(RFP)熒光強(qiáng)度的jing確記錄,并進(jìn)一步計(jì)算出蛋白對(duì)之間jing確的能量轉(zhuǎn)移系數(shù)。