用移液器移液時細胞活力下降?INTEGRA移液器可以讓你做得更好!
細胞活力定義為樣品中活細胞所占的比例,是所有細胞培養(yǎng)技術(shù)中的基本考量要素。對于某些實驗,比如細胞毒性試驗,細胞活力是度量給定藥物毒性的指標。而在其他的應(yīng)用,例如單克隆抗體的生產(chǎn)中,它則是細胞培養(yǎng)技術(shù)與產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要元素。培養(yǎng)細胞時,目標是一致地生產(chǎn)高活力且可重復(fù)的細胞樣品。在所有的情況下,為了避免影響結(jié)果的可重復(fù)性和可靠性,細胞培養(yǎng)方法和工作流程不影響細胞活力是很重要的。
會影響細胞活力的參數(shù)有很多,包括環(huán)境條件、傳代次數(shù)以及培養(yǎng)基相關(guān)因素等等。然而,每一個不確定因素,甚至是處理技術(shù)的差異,都可能影響細胞的健康和結(jié)果的可重復(fù)性。其中的一些影響顯而易見,更容易控制。例如微生物污染會形成明顯可見的構(gòu)造和菌落,又如年老的細胞會隨著衰老發(fā)展出不同的表型。然而,應(yīng)力對活力的影響可能只有在培養(yǎng)期間或培養(yǎng)后,或者通過專門的染色才會顯現(xiàn)。剪切力是細胞在移液、毛細管轉(zhuǎn)移以及離心過程中必然會遭受的應(yīng)力因素之一,能夠降低細胞活力和增殖。關(guān)于細胞可承受剪切應(yīng)力大小的觀點說法不一,但學界一致認為,超過臨界極限可能會損害細胞健康,并因此導致細胞裂解或細胞死亡等后果。剪切力對細胞活力的影響并不總是顯而易見的,有報道稱,在施加應(yīng)力后的長達24小時內(nèi),細胞活力出現(xiàn)了明顯的降低。
細胞培養(yǎng)工作流程中的許多重要階段(例如細胞分離、取樣、接種以及基于細胞的檢測)都需要使用移液器進行混合。如果操作不慎,可能會在槍頭孔口處發(fā)生細胞剪切。如同在地鐵上驅(qū)使忙碌擁擠的人群一般,迫使細胞通過過于狹窄的管道,或以過快的速度通過,都有可能造成細胞創(chuàng)傷。當槍頭孔徑縮小或流速增加時,細胞活力、鋪展和增殖都會受到影響。 大孔徑槍頭的開孔直徑更大,可降低對細胞的應(yīng)力,但這只解決了問題的一半。使用手動移液器時,每一次的混合動作都略有差異。驟然的開始和停止,以及柱塞速度的變化都是不可避免的,這也必然導致分離細胞所需的混合步驟數(shù)量各不相同。這些混合和移液速度中的不確定因素可能會使細胞承受不同水平的剪切力,從而影響結(jié)果的可重復(fù)性。
更進一步的解決方案
輕柔的處理和正確的工具能夠提高細胞活力。移取易碎的細胞樣品時,選擇大口徑槍頭始終是明智的選擇,因為它們的孔口更大,便于細胞流過。精密的電動移液器允許使用者選擇、編制和保存清晰設(shè)定分液速度和混合動作的移液流程,以便每一次都能夠以相同的速度執(zhí)行每一個動作,這也有助于減少移液性能的不確定性。這些模式通常都是預(yù)先設(shè)置的,或者可以自定義來滿足應(yīng)用的需要。這消除了使用者技術(shù)或經(jīng)驗對細胞處理質(zhì)量和一致性的影響,降低了剪切力對細胞活力的隱藏影響,并造就了產(chǎn)量更高、更健康的細胞——在所有的細胞處理任務(wù)中提供滿意的可重復(fù)性。
INTEGRA移液器
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