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兔皮層神經(jīng)元細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25
貨號(hào) YS-01X8408 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
兔皮層神經(jīng)元細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:MFC小鼠前胃癌細(xì)胞 SNU-387 (人肝癌細(xì)胞) 兔小腸黏膜上皮細(xì)胞 人類皰疹病毒8 G蛋白偶聯(lián)受體抗體 小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞 干擾素α21抗體 人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 EIF2G蛋白抗體

詳細(xì)介紹

兔皮層神經(jīng)元細(xì)胞

兔皮層神經(jīng)元細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

神經(jīng)元細(xì)胞樣

YS-01X8408

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔皮層神經(jīng)元分離自腦皮層組織;皮層神經(jīng)元細(xì)胞是構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元是具有長(zhǎng)突觸(軸突)的細(xì)胞,它由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成。在長(zhǎng)的軸突上套有一層鞘,組成神經(jīng)纖維,它的末端的細(xì)小分支叫做神經(jīng)末梢。細(xì)胞體位于腦、脊髓和神經(jīng)節(jié)中,細(xì)胞突起可延伸至全身各器官和組織中。細(xì)胞體是細(xì)胞含核的部分,其形狀大小有很大差別,直徑約4-120微米。核大而圓,位于細(xì)胞中央,染色質(zhì)少,核仁明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有斑塊狀的核外染色質(zhì),還有許多神經(jīng)元纖維。細(xì)胞突起是由細(xì)胞體延伸出來的細(xì)長(zhǎng)部分,又可分為樹突和軸突。每個(gè)神經(jīng)元可以有一或多個(gè)樹突,可以接受刺激并將興奮傳入細(xì)胞體。每個(gè)神經(jīng)元只有一個(gè)軸突,可以把興奮從胞體傳送到另一個(gè)神經(jīng)元或其他組織,如肌肉或腺體。皮質(zhì)神經(jīng)元是大腦皮質(zhì)的主要組成細(xì)胞之一,是大腦進(jìn)行功能活動(dòng)調(diào)節(jié)的基本單位,參與動(dòng)物多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程。通過形態(tài)學(xué)觀察顯示神經(jīng)元從貼壁、伸出突起開始;突起逐漸增多,而后突起進(jìn)一步增多并逐漸成網(wǎng),同時(shí)細(xì)胞胞體增大,周邊光暈明顯。10-12d細(xì)胞為豐滿,隨后神經(jīng)元開始裂解,突起逐漸減少,細(xì)胞已退化變性,輪廓模糊,光暈消失,細(xì)胞變形。

方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的兔皮層神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的兔皮層神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件:PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基:含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性:屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液:0.125%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

兔皮層神經(jīng)元體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔皮層神經(jīng)元細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔皮層神經(jīng)元細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human TFR2 (ansferrin Receptor 2) ELISA Kit

人游離睪(F-TESTO)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human F-TESTO (Free Testosterone) ELISA Kit

人轉(zhuǎn)移因子(TF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human TF (ansfer Factor) ELISA Kit

人轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TNPO1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human TNPO1 (anspoin 1) ELISA Kit

S100鈣結(jié)合蛋白A12抗體

磷酸化蛋白激酶C結(jié)合蛋白2抗體

ACHE重組小鼠 Acetylcholinesterase / ACHE 蛋白 Protein

AR (Androgen Receptor 0.5mgAR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受體(多肽抗原)

ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL24 Protein Human 重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白

VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-22僀?僀

AR (Androgen Receptor 0.5mgAR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受體(多肽抗原)

IL24 Protein Human 重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白

ACHE重組小鼠 Acetylcholinesterase / ACHE 蛋白 Protein

VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標(biāo)簽)

ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

豚鼠干擾素γ(IFNγ)試劑盒 ,英文名: IFNγ ELISA Kit

Human calcium binding protein (CR) ELISA Kit 人鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒

rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 兔子腦素/腦尿肽(BNP)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

CLIAKitforBACE1(HumanBeta-siteAPP-CleavingEnzyme1)ELISAkit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1

線蟲果蠅轉(zhuǎn)座子Mos1熱休克誘導(dǎo)突變?cè)噭┖?span>10

rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit兔子腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔皮層神經(jīng)元細(xì)胞兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA 試劑盒

Human vascular endothelial cell growth factor D (VEGF-D) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)試劑盒

Humansystemiclupuserythematosus,SLEELISAKit 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

HumanE-Selectin試劑盒人E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織S6KINASE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

Humanosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit人破骨細(xì)胞分化因子(ODF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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