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小鼠直腸平滑肌細(xì)胞

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更新時間:2024-11-04 16:39:56瀏覽次數(shù):744

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7169 主要用途 僅供科研研究實驗
小鼠直腸平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:回腸絨毛刷狀緣膜蛋白抗體 鋅指蛋白852抗體 β淀粉樣肽 1-40(C端)抗體 小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞 大鼠成骨細(xì)胞 人肺鱗癌細(xì)胞-LUC;NCI-H1703-Luc GFP標(biāo)記小鼠成肌細(xì)胞;C2C12-GFP

詳細(xì)介紹

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

直腸組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7169

細(xì)胞簡介:

小鼠直腸平滑肌分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,下端以而終。直腸上端的大小似結(jié)腸,其下端擴大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,最下端變細(xì)接。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈,來自髂內(nèi)動脈的直腸中動脈和來自髂內(nèi)動脈的直腸下動脈。平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運動方式;腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導(dǎo)致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生,這進(jìn)一步證明了炎癥時的腸平滑肌細(xì)胞具有可塑性。利用腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng),可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結(jié)締組織對平滑肌細(xì)胞的反應(yīng)。

方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠直腸平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠直腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

兔基質(zhì)金屬蛋白9MMP-9)試劑盒   96T/48T

兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-)試劑盒   96T/48T

兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒   96T/48T

兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒   96T/48T

小鼠D-乳酸(D-LAC)試劑盒 96T/48T

Rat vitamin C (VC) ELISA Kit 大鼠C(VC)試劑盒

HumanDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISAKit 人脫輕表雄酮S7(DHEA-S7)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanColonCancerAigen,CCA試劑盒人結(jié)腸癌抗原(CCA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織AMPK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

Humanpyruvatekinase,PKELISAKit人同酸激酶(PK)試劑盒規(guī)格:96T/48T

G蛋白偶聯(lián)受體GPRC5C蛋白抗體

甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域4抗體

ACP5重組小鼠 ACP5 / TRAP 蛋白 Protein

CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2 0.5mgCAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原

TYRP1重組人 TRP1 / TYRP1 蛋白 Protein

HRAS Protein Human 重組人 HRAS / GTPase Hras 蛋白

PROM1 Protein Rat 重組大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2 0.5mgCAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原

HRAS Protein Human 重組人 HRAS / GTPase Hras 蛋白

ACP5重組小鼠 ACP5 / TRAP 蛋白 Protein

PROM1 Protein Rat 重組大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

TYRP1重組人 TRP1 / TYRP1 蛋白 Protein

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞大鼠雌激素受體(ER)試劑盒 ,英文名: ER ELISA Kit

Mouse aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(P)試劑盒

ELISA 小鼠C反應(yīng)蛋白(mouse CRP)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforLH促黃體生成素

通用型HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR擴增試劑盒20

ELISAKitBNP腦素/腦尿肽

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行


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