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小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024-11-04 15:53:03瀏覽次數(shù):746

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7599 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:MYRIP蛋白抗體 鋅指蛋白836抗體 著絲粒蛋白抗體 小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 大鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 人成骨肉瘤細(xì)胞;SAOS-2-LUC HCMEC/D3永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!

產(chǎn)品名稱:小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源:皮膚組織

產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

細(xì)胞簡介:

小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞

小鼠真皮微血管內(nèi)皮分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細(xì)胞(MEC)在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域,由于表皮細(xì)胞、真皮成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟,人們對(duì)這兩種細(xì)胞早已進(jìn)行了大量深入的研究。與之相比,對(duì)參與創(chuàng)面愈合過程的另一種主要細(xì)胞——真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞,則因其體外分離培養(yǎng)技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。

方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠真皮微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠真皮微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞


培養(yǎng)步驟:

小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞

兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒   96T/48T

兔子胰島素(INS)試劑盒   96T/48T

兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒   96T/48T

兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒   96T/48T

小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human glycogen phosphorylase MM (GP-MM) ELISA Kit 人糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)試劑盒

HumanproteinkinaseB,PKBELISAKit 人蛋白激酶B(PKB)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBonemorphogeneticproteieceptor,BMPR-Ⅱ試劑盒人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物組織DNA損傷彗星熒光試劑盒20

HumanStemCellFactorReceptor,SCFRELISAKit人干細(xì)胞因子受體(SCFR)試劑盒規(guī)格:96T/48T

FLJ37543蛋白抗體

輔酶合成加氧酶COQ7抗體

GP120重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) Protein

Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 0.5mgTie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2) 上皮生長因子樣域酪激酶2抗原

CD74重組人 CD74 蛋白 Protein

FZD4 Protein Human 重組人 Frizzled-4 / FZD4 / CD344 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

LEFTY2 Protein Human 重組人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 0.5mgTie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2) 上皮生長因子樣域酪激酶2抗原

FZD4 Protein Human 重組人 Frizzled-4 / FZD4 / CD344 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GP120重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) Protein

LEFTY2 Protein Human 重組人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CD74重組人 CD74 蛋白 Protein

小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠促甲狀腺素(TSH)試劑盒 ,英文名: TSH ELISA Kit

Mouse collagen type N N-terminal peptide (X) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)試劑盒

ELISA 小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforLH(Mouseleoopichormone)ELISAKit小鼠促黃體激素

通用型HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20

ELISAKitAChRab乙酰受體抗體

收到細(xì)胞如何處理?

小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作


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