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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠胰腺上皮細(xì)胞
組織來源:胰腺組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
小鼠胰腺上皮分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。胰腺干細(xì)胞在發(fā)育上被認(rèn)為分離自內(nèi)胚層胰腺上皮,在隨后的胰腺發(fā)育過程中,胰腺干細(xì)胞分化為胰島細(xì)胞(α、β、δ、PP細(xì)胞)、導(dǎo)管上皮細(xì)胞以及腺泡細(xì)胞。胰腺組織中還存在大量的間充質(zhì)來源的細(xì)胞,包括成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞以及星形細(xì)胞,其中以成纖維細(xì)胞占主要部分。要離體分離培養(yǎng)獲得胰腺上皮細(xì)胞就要排除間充質(zhì)來源的細(xì)胞,尤其是成纖維細(xì)胞。目前常用的去除成纖維細(xì)胞方法有機(jī)械刮除法、消化以及膠原酶消化法等,胰腺上皮細(xì)胞的病變與急慢性胰腺炎的發(fā)生具有重大意義。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胰腺上皮采用膠原酶分次消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胰腺上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
糖化血紅蛋白()測試盒 Glycosylated hemoglobin () test kit
肝/肌糖元測試盒 Liver / muscle glycogen test kit
β-葡萄糖酸苷酶測試盒 Beta - glucose - acid - enzyme test case
紅細(xì)胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測試盒 Erythrocyte NADH high iron hemoglobin reductase test kit
小鼠(HYD)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human urinary free coisol (UFC) ELISA Kit 人尿游離(UFC)試劑盒
HumanMyosinlightChain,MLCELISAKit 人肌球蛋白輕鏈(MLC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineapigovalbuminspecificIgG,OVAsIgG試劑盒豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)綠色熒光測定試劑盒50次
Mousebonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit小鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FAM55C蛋白抗體
二?;视王;D(zhuǎn)移酶2樣蛋白6抗體
Spike中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike protein fragment (RBD, aa 367-606, His 標(biāo)簽) Protein
Tau protein 微管相關(guān)蛋白(抗原 0.5mgTau protein 微管相關(guān)蛋白(抗原)
CTLA4重組人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
IFNL1 Protein Human 重組人 IL29 / IFNL1 蛋白
TREM1 Protein Human 重組人 TREM1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
Tau protein 微管相關(guān)蛋白(抗原 0.5mgTau protein 微管相關(guān)蛋白(抗原)
IFNL1 Protein Human 重組人 IL29 / IFNL1 蛋白
Spike中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike protein fragment (RBD, aa 367-606, His 標(biāo)簽) Protein
TREM1 Protein Human 重組人 TREM1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
CTLA4重組人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠胰腺上皮細(xì)胞大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)試劑盒 ,英文名: CRF ELISA Kit
Mouse 15 lipoxygenase (15-LO/LOX) ELISA Kit 小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)試劑盒
ELISA 小鼠骨成型蛋白受體1A(mouse BMP-R1A) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLIFR(Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor)ELISAKit小鼠白血病抑制因子受體
通用型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒10次
ELISAKit17-OHCS雞17羥皮質(zhì)類固醇
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作