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小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞

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更新時間:2024-11-04 15:45:32瀏覽次數(shù):661

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7074 主要用途 僅供科研研究實驗
小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:肌間蛋白1抗體 高爾基體膜相關(guān)蛋白抗體 ZNFX1蛋白抗體 小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞 大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞 DLD-1 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 SK-MEL-5人黑素瘤細(xì)胞

詳細(xì)介紹

小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞

小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

胰腺組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

上皮細(xì)胞樣

YS-01X7074

細(xì)胞簡介:

小鼠胰腺導(dǎo)管上皮分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運(yùn)動、胰液分泌和膽囊收縮。成體胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞作為胰腺前體細(xì)胞,已證實具多向分化潛能,在合適的外源性刺激下可分化成胰島樣細(xì)胞,胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的胰島樣細(xì)胞免疫原性如何,轉(zhuǎn)分化的胰島樣細(xì)胞在治療糖尿病時是否發(fā)生免疫排斥反應(yīng),對干細(xì)胞臨床治療糖尿病具有重要意義。

方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠胰腺導(dǎo)管上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠胰腺導(dǎo)管上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名稱   方法   規(guī)格

小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠C(VC)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human phosphatidylinositol specific phospholipase C (PIPLC) ELISA Kit 0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)試劑盒

Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit 2,3-0酸甘油酸(2,3-DPG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenLeukemiainhibitoryfactor,LIF試劑盒雞白血病抑制因子(LIF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

載玻片細(xì)胞JNK/SAPK蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20

MouseGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)試劑盒規(guī)格:96T/48T

FAM162A蛋白抗體

耳聾-甲狀腺腫綜合征相關(guān)COBL蛋白抗體

LYPD3重組小鼠 C4.4A / LYPD3 蛋白 Protein

Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原 0.5mgAlpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原)

NLK重組人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白

ENPEP Protein Rat 重組大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (aa 41-945, His 標(biāo)簽)

半乳糖凝集素9(GAL9)重組蛋白 Recombinant Galectin 9 (GAL9)

CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白

EGFR重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白

LYZL2重組人 Lysozyme 2 / LYZL2 蛋白 Protein

小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞大鼠促腎上腺皮質(zhì)素釋放激素結(jié)合蛋白(CRHBP)試劑盒 ,英文名: CRHBP ELISA Kit

P selectin (P-S P選擇素(P-S

Ratsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforCT-1ELISAKit大鼠心肌營養(yǎng)素1

細(xì)胞涂片巴氏(papanicolaou;PAP)染色試劑盒50

RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行


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