詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胎盤組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7678 |
細胞簡介:
小鼠胚胎羊膜分離自羊膜組織;羊膜為單層上皮細胞互相連接構(gòu)成的薄膜。單層上皮細胞具有分泌羊水的作用。隨著胚胎的生長發(fā)育,羊膜與絨毛密切緊貼,形成胎膜。胎膜隨著羊膜腔逐漸擴大而呈半透明的薄膜,無血管,富有韌性(胎膜也就是羊膜腔的囊壁)。羊膜腔內(nèi)充滿的液體為羊水。羊膜僅覆蓋在胎盤的兒體面,并不深入胎盤組織中,隨著妊娠的進展羊膜腔逐漸擴大,占據(jù)整個子宮腔,羊膜是胎膜最內(nèi)一層,是一層半透明的薄膜,與覆蓋在胎盤、臍帶的羊膜層相連接。羊膜是胎盤的最內(nèi)層,與人眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,含有眼表上皮細胞,包括結(jié)膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì),其光滑,無血管、神經(jīng)及淋巴,具有一定的彈性,厚0.02~0.5mm,在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,主要為i、iii、iv、v、vii型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份,正是這些成份使羊膜可以充當“移植的基底膜"而發(fā)揮一種新的健康合適的基質(zhì)。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質(zhì)細胞組成,均具有多分化潛能,可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠羊膜胚胎采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠羊膜胚胎經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠合成酶試劑盒 小鼠合成酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠合成酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠合成酶試劑盒、小鼠合成酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠胰淀素試劑盒 小鼠胰淀素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠胰淀素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠胰淀素試劑盒、小鼠胰淀素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠抑制素試劑盒 小鼠抑制素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠抑制素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抑制素試劑盒、小鼠抑制素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠增殖細胞核抗原試劑盒 小鼠增殖細胞核抗原試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠增殖細胞核抗原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠增殖細胞核抗原試劑盒、小鼠增殖細胞核抗原eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human rheumatoid factor (RF) ELISA Kit 人類風(fēng)濕因子(RF)試劑盒
Humancholyglycine,CGELISAKit 人甘膽酸(CG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
associatedproteinA,SP-A試劑盒大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒規(guī)格:96T/48T
游離脂肪酸化學(xué)比色法定量試劑盒50次
MouseiactParathormone,i-PTHELISAKit小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
ECHDC1蛋白抗體
凋亡相關(guān)蛋白5抗體
COLEC10重組小鼠 COLEC10 蛋白 (Fc 標簽) Protein
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)
FASLG重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 Protein
CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白
ACVR1 Protein Canine 重組狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 標簽)
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)
CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白
COLEC10重組小鼠 COLEC10 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ACVR1 Protein Canine 重組狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 標簽)
FASLG重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 Protein
小鼠羊膜胚胎細胞大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)試劑盒 ,英文名: Big ET ELISA Kit
Porcine adiponectin (ADP) ELISA Kit 豬脂聯(lián)素(ADP)試劑盒
ELISA 小鼠白蛋白(mouse Albumin) 進口分裝
CLIAKitforLN(HumanLaminin)ELISAKIT人層連蛋白/板層素
通用型DNA平滑末端連接克隆試劑盒10次
ELISAKitβ-lactamase雞β內(nèi)酰胺酶
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行