詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
牙齦組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7720 |
細(xì)胞簡介:
小鼠牙齦成纖維分離自牙齦組織;牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織,呈粉紅色、有光澤、質(zhì)堅(jiān)韌。牙齦邊緣稱為齦緣,正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦,通稱牙床;是指包住齒頸的黏膜組織,粉紅色,內(nèi)有很多血管和神經(jīng)。牙齦表面為復(fù)層鱗狀上皮,有角化層或不全角化層。上皮釘較長,伸入結(jié)締組織。牙齦上皮不僅覆蓋牙齦外露部分,而且也轉(zhuǎn)向內(nèi)側(cè),覆蓋齦溝壁稱為溝內(nèi)上皮;一部分附著在牙體上稱為結(jié)合上皮。牙齦的固有層為各種方向交織的結(jié)締組織纖維束,其中最主要的成分是膠原纖維,它占全部結(jié)締組織56%。牙齦中為數(shù)最多的細(xì)胞為成纖維細(xì)胞,肥大細(xì)胞也常在牙齦中出現(xiàn),此外還有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙齦成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙齦成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠合成酶(NOS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠組胺(HIS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human T lymphoopic virus type I (HTLV- I) ELISA Kit 人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)試劑盒
Humanlipidperoxlde,LPOELISAKit 人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Avianencephalomyelitis,AE試劑盒禽腦脊髓(AE)試劑盒規(guī)格:96T/48T
游離脂肪酸化學(xué)比色法定量試劑盒50次
MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein6,IGFBP-6ELISAKit小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)試劑盒規(guī)格:96T/48T
DAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激酶2抗體
蛋白酪磷酸酶非受體型4抗體
IGFBP2重組食蟹猴 IGFBP2 蛋白 Protein
MLC/Myosin light chain 3 peptide 肌球蛋白輕鏈3抗原 0.5mgMLC/Myosin light chain 3 peptide 肌球蛋白輕鏈3抗原
BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein
CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NXPH1 Protein Mouse 重組小鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白
MLC/Myosin light chain 3 peptide 肌球蛋白輕鏈3抗原 0.5mgMLC/Myosin light chain 3 peptide 肌球蛋白輕鏈3抗原
CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IGFBP2重組食蟹猴 IGFBP2 蛋白 Protein
NXPH1 Protein Mouse 重組小鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白
BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein
小鼠牙齦成纖維細(xì)胞大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)試劑盒 ,英文名: MCP-2/CCL8 ELISA Kit
Porcine acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit 豬乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒
ELISA 小鼠心素(mouse ANP) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLPAb-IgM(HumanLegionellaaibodyIgM)ELISAKit人軍團(tuán)菌抗體IgM
通用型CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitIL-18雞白介素18
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行