詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
牙乳頭組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7400 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠牙乳頭分離自牙乳頭組織;牙乳頭細(xì)胞來源于外胚間充質(zhì),具有多向分化潛能,是體內(nèi)分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞的前體細(xì)胞,該細(xì)胞在牙發(fā)育和牙體牙髓損傷修復(fù)過程中起重要作用。牙乳頭細(xì)胞為未分化的間充質(zhì)細(xì)胞,有少量微細(xì)的膠原纖維分散在細(xì)胞外間隙。在鐘狀期,被成釉器凹陷部包圍的外胚間葉組織增多,并出現(xiàn)細(xì)胞的分化。在內(nèi)釉上皮的誘導(dǎo)下,牙乳頭外層細(xì)胞分化為高柱狀的成牙本質(zhì)細(xì)胞。這些細(xì)胞在切緣或牙尖部為柱狀,在牙頸部細(xì)胞尚未分化成熟,為立方狀。牙乳頭在牙發(fā)育中有重要作用?,F(xiàn)已證明,牙乳頭是決定牙形狀的重要因索。例如,將切牙的成釉器與磨牙的牙乳頭重新組合,結(jié)果形成磨牙;與此相反,切牙的牙乳頭與磨牙成釉器重新組合,結(jié)果形成切牙。牙乳頭還可以誘導(dǎo)非牙源性的口腔上皮形成成釉器。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙乳頭采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙乳頭經(jīng)DMP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠組織多肽抗原(mouse TPA) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠血小板生成素(mouse TPO) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(mouse AIL/APO 2L) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1(mouse AIL R1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠胰島素(INS)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat cholecystokinin / cholecystokinin (CCK) ELISA Kit 大鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒
Humanaimousaibody,HAMAELISA 人抗鼠抗體(HAMA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor17-OHPELISAKit大鼠17羥孕同
飲料離子(K)濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20次
MouseLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit小鼠白三烯C4(LTC4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
charlevoix-saguenay型痙攣性共濟(jì)失調(diào)Sacsin蛋白抗體
蛋亞砜還原酶B3抗體
HA重組甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
SAP-1 (Synapse associated protein-I 0.5mgSAP-1 (Synapse associated protein-I) peptide 突觸相關(guān)蛋白-1(多肽抗原)
TGFBR1重組人 TGFBR1 / ALK-5 / SKR4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CD1D & B2M Protein Human 重組人 CD1D & B2M Heterodimer 蛋白
IL17RD Protein Human 重組人 IL17RD 蛋白
SAP-1 (Synapse associated protein-I 0.5mgSAP-1 (Synapse associated protein-I) peptide 突觸相關(guān)蛋白-1(多肽抗原)
CD1D & B2M Protein Human 重組人 CD1D & B2M Heterodimer 蛋白
HA重組甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
IL17RD Protein Human 重組人 IL17RD 蛋白
TGFBR1重組人 TGFBR1 / ALK-5 / SKR4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠牙乳頭細(xì)胞大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4)試劑盒 ,英文名: MCP-4 ELISA Kit
Porcine insulin-like growth factor binding protein 3 (IGFBP-3) ELISA Kit 豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)試劑盒
ELISA 小鼠血管緊張素II(mouse ANG II) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLp-Alpha(RabbitlipoproteinAlpha)ELISAKit兔脂蛋白α
通用型CHIPDNA分子庫(kù)構(gòu)建試劑盒10次
ELISAKitIL-2雞白介素2
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行