詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
尿道 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8516 |
細胞簡介:
小鼠尿道平滑肌分離自尿道管組織;尿道是從膀胱通向體外的管道。起自膀胱的尿道內(nèi)口,止于尿道外口,行程中通過前列腺部、膜部和陰莖海綿體部,尿道在尿道膜部有一環(huán)橫行紋肌構(gòu)成的括約肌,稱為尿道外括約肌,由意識控制。尿道有三個解剖上的較狹部和膨大部,前者分別位于外口、膜部和內(nèi)口,后者位于舟狀窩、球部和前列腺部。尿道壁為粘膜層、粘膜下層和肌肉層所組成。在前尿道的外面,還包有豐富的彈力纖維和平滑肌纖維的尿道海綿體。尿道粘膜上皮在前列腺部為移行上皮(近膀胱部),一部分為多列或復(fù)層柱狀上皮,在有尿道海綿體的一部分尿道,主要為復(fù)層柱狀上皮,在皺襞上也有單層柱狀上皮。特別在舟狀窩內(nèi)有許多環(huán)狀細胞,舟狀窩的遠端部開始有未角化的復(fù)層鱗狀上皮。粘膜下層血液供應(yīng)豐富,主要為結(jié)締組織。肌肉層有縱行肌和外環(huán)形肌。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠尿道平滑肌采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過平滑肌細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠尿道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠尿道平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
增殖誘導(dǎo)配體 英文名稱: a proliferation-inducing ligand 英文縮寫: APRIL
水通道蛋白-4 英文名稱: Aquaporin-4 英文縮寫: AQP-4
乙酰受體抗體 英文名稱: ai-acetylcholine receptor 英文縮寫: AChR-Ab
環(huán)0酸腺苷 英文名稱: cyclic adenosine monophosphate 英文縮寫: cAMP
NK細胞受體2A抗體
FOXI2蛋白抗體
BTLA重組大鼠 BTLA 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
Collagen III (Anti--Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti--Collagen Type III ) Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
OSM重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACO2 Protein Human 重組人 ACO2 / Aconitase 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
CD22僀?僀
Collagen III (Anti--Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti--Collagen Type III ) Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
ACO2 Protein Human 重組人 ACO2 / Aconitase 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
BTLA重組大鼠 BTLA 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
CD226 Protein Mouse 重組小鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
OSM重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
植物赤3(GA3)ELISA 試劑盒
Human ai respiratory syncytial virus aibody (RSV) ELISA Kit 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)試劑盒
PorcineHistamine,HISELISAKit 豬組胺(HIS)試劑盒分裝
ADVIgMXI腺病毒IgMⅪ型(間接法二步法)
血液(NO)活性比色法定量試劑盒50次
MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒
小鼠尿道平滑肌細胞大鼠輔肌動蛋白α2(ACTN2)試劑盒 ,英文名: ACTN2 ELISA Kit
Rat beta defensin (beta -Defensins) ELISA Kit 大鼠β-防御素(β-Defensins)試劑盒
Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit 大鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒分裝
CLIAKitfordsDNA(Humanai-doublesandedDNA)ELISAKIT人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體
細胞培養(yǎng)液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)紅色熒光測定試劑盒(超氧陰離子)20次
RathighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒