詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
嗅球組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 | YS-01X7365 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠嗅鞘分離自嗅球組織;嗅鞘細(xì)胞(OECs)是在功能上介于施旺細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞之間的一種特殊的膠質(zhì)細(xì)胞,具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)、抑制膠質(zhì)增生、瘢痕形成、成鞘作用等;為軸突生長(zhǎng)提供了適宜的微環(huán)境及較強(qiáng)的遷移的特性,使其成為促進(jìn)中樞神經(jīng)再生的理想候選細(xì)胞之一。嗅鞘細(xì)胞是目前所發(fā)現(xiàn)的極少數(shù)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)可以再生細(xì)胞之一,其特點(diǎn)為終身具有神經(jīng)再生功能,還能夠釋放多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、神經(jīng)粘附分子。被認(rèn)為是髓鞘化能力的膠質(zhì)細(xì)胞,逐漸用于治療脊髓損傷。嗅鞘細(xì)胞與膠質(zhì)細(xì)胞、雪旺細(xì)胞在表現(xiàn)型上有共同點(diǎn),它們都能促進(jìn)軸突的再生,主要區(qū)別在于嗅鞘細(xì)胞不但存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng),也存在于外周神經(jīng)中。嗅鞘細(xì)胞被認(rèn)為是一種可塑性很高的細(xì)胞,它可表現(xiàn)出多種細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞表面標(biāo)志,在嗅系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中,嗅鞘細(xì)胞根據(jù)其在組織定位的不同而有不同的抗原表型,其中P75NTR、GFAP、和O4可標(biāo)記大部分在體嗅鞘細(xì)胞,然而在嗅球外神經(jīng)層O4陽(yáng)性嗅鞘細(xì)胞仍然可以在P75NTR陽(yáng)性細(xì)胞層內(nèi)分化成E-NCAM陽(yáng)性的細(xì)胞層,還有一定比率的嗅鞘細(xì)胞P75NTR陰性而NY和S100表型為陽(yáng)性。嗅黏膜中的神經(jīng)元是生后才生長(zhǎng)并在成年時(shí)繼續(xù)分化的神經(jīng)元,壽命為4-12周,隨著新細(xì)胞的生長(zhǎng),又建立了新的神經(jīng)支配關(guān)系。嗅鞘細(xì)胞存在于嗅神經(jīng)及嗅球的神經(jīng)層上,沿嗅神經(jīng)的全長(zhǎng),從周圍神經(jīng)系統(tǒng)到中樞神經(jīng)分布。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠嗅鞘采用-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠嗅鞘經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠孕受體(PROGR)ELISAkit ELISA. 96T/48T
小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISAKit ELISA. 96T/48T
中文名稱 方法 規(guī)格
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat azidothymidine (AZT) ELISA Kit 大鼠(AZT)試劑盒
HumanαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISAKit 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor(Mouseai-IVIgGaibody)ELISAKit小鼠抗IVIgG抗體
飲料乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
MouseIerleukin5,IL-5ELISAKit小鼠白介素-5(IL-5)試劑盒規(guī)格:96T/48T
BHLHE41抗體
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體4單克隆抗體
CDC37重組小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
骨形成蛋白6(BMP6)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6)
ARF3重組人 ARF3 / ADP-ribosylation factor 3 蛋白 Protein
CD300C Protein Human 重組人 CD300C / CMRF-35 / IGSF16 蛋白
FGF1 Protein Canine 重組狗 aFGF / FGF1 蛋白
骨形成蛋白6(BMP6)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6)
CD300C Protein Human 重組人 CD300C / CMRF-35 / IGSF16 蛋白
CDC37重組小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
FGF1 Protein Canine 重組狗 aFGF / FGF1 蛋白
ARF3重組人 ARF3 / ADP-ribosylation factor 3 蛋白 Protein
小鼠嗅鞘細(xì)胞大鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 ,英文名: CCK ELISA Kit
Porcine fibrinogen degradation product (FDP) ELISA Kit 豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒
ELISA 小鼠Active Caspase-3 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLPL(Humanlipoproteinlipase)ELISAKit人脂蛋白脂酶
通用腺病毒骨架載體(pAdEasy-1)500納克
ELISAKitC3SP雞補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物